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研究背景Cyclin D1是细胞周期蛋白(Cyclins)家族中的一员,参与调控细胞周期的进程。它是G1期的细胞周期调控素,参与正向调控细胞G1/S期的关键限定点(restriction point),进而推动细胞由静止期进入分裂周期,从而执行细胞增殖过程；当其表达异常,可导致细胞周期调控紊乱,增殖失调,进而形成肿瘤。Cyclin D1与乳腺的关系较为密切,研究表明,它对胚胎生长发育的影响具有一定的组织特异性,特别在对乳腺上皮细胞的发育及分化方面,起到了不可或缺的调控作用。而在乳腺癌中常可检测到Cyclin D1过表达及一定比例的基因扩增,且已有动物实验研究证实,Cyclin D1过表达可导致乳腺上皮细胞异常增生及发展成为浸润性癌。这些研究均提示Cyclin D1有可能在乳腺癌的发生、发展过程中起到了重要的推动作用。乳腺浸润性小叶癌(Invasion lobular carcinoma, ILC)是乳腺癌中第二大类常见组织学类型,约占乳腺癌的5-15%左右,其发病机制目前尚不清楚。由于其发病率远低于乳腺浸润性导管癌(Invasive ductal carcinoma, IDC),且其肿瘤细胞之间的粘附性差,在纤维性间质中散在浸润,不易提取及培养,故其相关分子病理学研究较少,使得目前对于ILC的分子病理学认识较为不足。文献报道,CyclinD1在80%左右的ILC中均呈阳性表达,但其基因水平的检测鲜有报导。为明确ILC中Cyclin Dl的高表达是否与其基因水平异常有关,以便了解它是否在ILC的发病机制中起作用,我们设计了本实验：在73例经典型ILC中,通过免疫组化(immunohistochemisty, IHC)方法检测Cyclin D1的表达情况及通过荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)方法检测其编码基因CCND1的扩增情况,明确两者在ILC中的存在状况及两者间的相关关系；进一步将两者的检测结果与各临床、病理特征及病人预后相联系,探究两者在ILC中的临床及分子病理学意义。研究结果FISH结果显示：在26%(19/73)的ILC中检测到CCND1基因扩增；IHC结果显示：在94.5%(69/73)的ILC中检测到Cyclin Dl阳性表达：其中53.4%(39/69)呈弥漫强阳性表达(3+,6-7分),32.9%(24/69)呈中等强度阳性表达(2+,4-5分),而8.2%(6/69)呈弱阳性表达(1+,2-3分)；仅5.5%(4/73)的ILC呈阴性表达(-,0-1分)；在86.3%的ILC中存在着Cyclin D1高表达(2+、3+),这与CCND1基因扩增之间具有统计学相关性,提示CCND1基因扩增可导致Cyclin D1在ILC中高表达,从而在其发生机制中发挥致癌作用。而另一方面,两者阳性率之间存在着差异,同时反映出在ILC中还存在着一定比例的病例无基因扩增而呈蛋白高表达的状态,这说明基因扩增不是Cyclin D1高表达的唯一原因,在ILC中还可能存在着其它能导致Cyclin D1高表达的作用机制。查阅文献,我们发现Cyclin D1过表达机制的研究都以浸润性乳腺癌为对象,其中以IDC占绝大多数,未检索到专门针对ILC的研究文献；而研究结果显示,过表达的机制可涉及到：促进转录活性、增加蛋白翻译、减弱降解过程等众多方面。在这些机制假说中,最为符合ILC的是雌激素、雌激素受体(ER)及Cyclin D1三者之间的交叉作用机制；尽管这一机制的某些细节尚在研究中,但它极有可能在Cyclin D1高表达的作用机制中占据主导地位,从而在ILC的发生、发展中起到重要的推动作用。进而,我们将CCND1基因扩增及Cyclin D1高表达与各临床、病理特征及术后随访资料相联系,其中各临床、病理特征包括：病人年龄是否大于50岁、肿瘤最大径是否大于2cm、淋巴结是否有转移、是否累及乳头间质及其下大导管、肿瘤单/多发、临床分期：早期(Ⅰ期)/中晚期(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期)、雌/孕激素受体的有无、Her-2是否过表达及P53是否突变等；随访资料包括术后转移及死亡相关的生存期统计；发现仅Cyclin D1高表达与ER阳性具有统计学相关性；而其余各组均未发现具有统计学相关性,这其中包括CCND1基因扩增与ER阳性两者间；这一结果进一步支持ER与Cyclin D1高表达两者间关系密切,它有可能在Cyclin D1高表达的机制中起到重要的促进作用；而无论CCND1扩增及Cyclin D1高表达,在评价临床预后方面均未显示出具有独立的预后指示作用；但这一点还需进一步随访加以证实。研究结论总之,我们的研究显示出：在超过80%的ILC中存在着Cyclin D1高表达(2+、3+)；在约1/4的ILC病例中存在着CCND1基因扩增,它可导致Cyclin D1高表达,从而在ILC的发生机制中起到重要的推动作用；而在CCND1无扩增的Cyclin D1高表达的病例中,Cyclin D1与ER之间的交叉作用机制可能在其高表达的机制中起到了关键作用；而无论CCND1扩增或是Cyclin D1高表达在临床、预后等方面均未显示出具有独立的预后评价作用；当然,这一点还需进一步随访加以证实。