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菖郁小复方由两味常用中药石菖蒲和郁金组成，出自《温病全书》中的菖蒲郁金汤，主治神志不清、癫痫、癔病和心悸等。本团队前期研究表明，该复方在动物模型上具有一定的抗癫痫作用。本文在对两种单味药材进行化学成分提取分离和结构鉴定、获得单体化合物对照品的基础上，采用HPLC-QTOF-MS/MS方法对单味药材和复方的化学成分进行系统分析鉴定，并以小鼠MES癫痫模型进行活性筛选，初步明确了药效部位，并初步分析鉴定了其主要成分。取得以下主要结果: 1、复方组成药材的化学成分分离及结构鉴定 采用多种色谱分离技术分别对组成复方的两昧药材的化学成分进行分离制备，并运用NMR等多种波谱技术对分离得到的化合物进行结构确证。从石菖蒲中共分离得到31个化合物，其中6个为新结构，分别为，spiro[azulene-5(6H),2-oxiran]-6-one, l,2,3,3a,4,8a-hexahydro-3,3,3,8-tetramethyl-8a-hydroxy(1),azuleno[3a,4-b]oxiren-3-one,hexahydro-1 a,6-dimethyl-4-(1-methylethylidene)(2),3a,7-epoxyazulen-6(2H)-one,1,2,3,3a,8,8a-hexahydro-1,4-dimethyl-7-(1-methylethenyl)(3),2-cyclohepten-1-one,6-methyl-3-(1-hydroxy-1-methylethyl)-7-(3-oxobutyl)(4),1-oxaspiro[4.4]non-3-en-2-one,6-(3-oxubutyl)-4,7-dimethyl(5)和4-methyl-5-(2，4，5-trimethoxyphenyl)dihydrofuran-2(3H)-one(6)。还有已知化合物asaronaldehyde，tatarinoid A，veraguensin,(9S，10S) polysphorinⅠ等23个，另外得到两个疑似人工产物，分别为(erythro)2，2，4-trimethy1-5-(2,4,5-trimethoxyphenyl)-1,3-dioxolane(24)和(threo)2,2,4-trimethyl-5-(2,4,5-trimethoxyphenyl)-1，3-dioxolan(25)。从郁金中共分离得到11个化合物，其中一个新化合物为7-(1-hydroxy-1-methylethyl)-1，4-dimethyl-2，3-dihydroazulen-6(1H)-one(7)，另外有gweicurculactone，4S-dihydrocurcumenone等10个已知化合物。 上述分离得到的化合物，既为下一步单味药材、复方及药效部位的成分分析提供了结构明确的化学对照品，提高分析鉴定结果的可靠性，也将用于药理活性筛选寻找活性物质。 2、石菖蒲成分分析鉴定 采用LC-ESI-QTOF-MS/MS技术，以从石菖蒲中分离得到的化合物作为对照品，通过对这些化合物的质谱裂解规律、保留时间以及相关文献数据的分析归纳，对石菖蒲甲醇提取物的化学成分进行了系统分析，从中共鉴定出46个化学成分，其中有kaempferol-3-O-rutinoside等3个黄酮苷类化合物，virolin等12个木脂素类，asarone等15个苯丙素类，tatarine C等6个生物碱以及部分其他类化合物。 3、郁金成分分析鉴定 采用LC-ESI-QTOF-MS/MS技术对郁金甲醇提取物的化学成分进行分析，以上述郁金药材中分离得到的单体化合物作为对照品，通过分析化合物的质谱裂解规律、保留时间及参照相关文献，从郁金提取物中鉴定出20个成分，其中comosoneⅡ等19个为倍半萜类化合物，一个二萜类化合物curcuminol D。 4、复方成分分析鉴定 采用与单味药材相同的液质联用分析方法，根据高分辨质谱提供的精确分子量，化合物的质谱裂解规律及出峰时间等，从菖郁小复方甲醇提取物中分析鉴定出40个主要成分，其中有30个成分来自药材石菖蒲，包括asarone等苯丙素类化合物14个，polysphorin等木脂素类化合物7个，tatarine A等生物碱6个以及其他类型化合物3个，另外gweicurculactone等10个倍半萜类化合物来自郁金。 5、复方药理筛选及活性部位的成分分析 与药理组合作，利用小鼠的MES癫痫模型对复方进行活性跟踪筛选，通过对不同溶剂提取和大孔树脂不同洗脱部位的药效筛选，明确了主要活性提取部位。在此基础上，采用LC-ESI-QTOF-MS/MS技术对活性部位进行成分分析，已鉴定出14个化学成分，包括asarone等苯丙素类8个，curcumenol等倍半萜类3个，tataramide B等生物碱2个以及1个木脂素类化合物tatarinowin。