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本文主要从以下几方面展开论述： 第一部分 肺气肿小鼠Helios+调节性T细胞变化及作用 目的:观察烟草烟雾暴露的肺气肿小鼠体内Helios+调节性T细胞的变化，探讨Helios+调节性T细胞在烟草烟雾暴露肺气肿小鼠的肺气肿发生中的作用。 方法:将鼠龄6-8周的健康雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为空气暴露组（对照组）和慢性烟草烟雾暴露组（烟熏组），慢性烟草烟雾暴露组用烟草烟雾暴露24周，空气暴露组用空气伪暴露24周，苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肺组织病理变化，计算肺泡平均内衬间隔(MLI)评估小鼠肺气肿程度。分离纯化小鼠外周血、脾脏和肺组织中单个核细胞(PBMCs)，用流式细胞术检测两组小鼠外周血、脾脏和肺组织中Helios+调节性T细胞的表达情况，荧光定量PCR法检测小鼠肺组织中IL-10、TGF-β、TNF-α mRNA表达水平，蛋白印迹法(Western blot)检测小鼠肺组织中性粒细胞弹性蛋白酶蛋白表达水平。免疫磁珠分选脾脏中调节性T细胞(Treg)，荧光定量PCR检测Treg细胞中Foxp3、GITR mRNA表达水平，同时蛋白印迹法检测Foxp3蛋白表达水平。采用相关性分析方法，对检测得到的结果进行处理，分析肺气肿小鼠体内Helios+调节性T细胞的表达水平与相应炎症相关因子的浓度及Treg细胞功能指标的相关性。 结果:(1)烟熏组的肺泡平均内村间隔(MLI)为(27.76±8.18)μm，明显高于对照组(16.57±3.71)μm，差异有统计学意义（P＜0.01），肺气肿模型复制成功。(2) Helios+调节性T细胞:与对照组相比，烟熏组小鼠外周血、脾脏、肺组织中Helios+ Treg细胞明显升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。(3)与对照组相比，烟熏组小鼠肺组织中，中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)表达水平上升，肺组织中IL-10 mRNA表达上升，TNF-α、TGF-β mRNA表达下降，差异有统计学意义(P＜0.05)。(4)烟熏组小鼠脾脏Treg细胞中Foxp3、GITR的表达明显高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。(5)相关性分析发现，烟熏组小鼠肺组织Helios+ Treg细胞与肺组织中IL-10 mRNA表达水平呈正相关（r=0.63，P＜0.05），与TGF-β、TNF-α mRNA表达无明显相关性(r=0.21、0.58，P＞0.05)，与肺组织中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)表达水平也无明显相关性(r=-0.48，P＞0.05);烟熏组小鼠脾脏中Helios+Treg细胞比例与脾脏Treg细胞中Foxp3、GITR呈正相关性(r=0.67、0.78，P＜0.05)。 结论:烟草烟雾暴露的肺气肿小鼠体内Helios+调节性T细胞的表达升高，与抑制炎症细胞因子IL-10存在正相关，并与Treg细胞中功能指标Foxp3、GITR的表达存在正相关关系。Helios+调节性T细胞可能参与烟草烟雾暴露造成的肺气肿的免疫炎症的发展过程。 第二部分 慢性阻塞性肺疾病患者外周血Helios+调节性T细胞的变化 目的:研究稳定期慢性阻塞性肺疾病患者外周血Helios+调节性T细胞在肺气肿中的变化及作用。 方法:收集17例2018年6月至2018年12月在广西医科大学第一附属医院门诊的稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者，同时收集不吸烟的健康人(nonsmoker)14例和吸烟肺功能正常人(healthy smoker)15例为对照组。将上述三组列为研究对象，比较分析各组的研究对象的一般临床资料，并抽取各组研究对象的外周血，采用密度梯度离心法，分离外周血中单个核细胞(PBMCs)，用流式细胞术检测各组外周血PBMCs中Helios+调节性T细胞（Helios+ Treg细胞）的表达比例。同时还采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组外周血血清中炎症相关细胞因子IL-10、TNF-α、TGF-β、IFN-γ的浓度。并同时对各组研究对象进行肺功能检测。采用相关性分析方法，对检测得到的结果进行处理，分析慢性阻塞性肺疾病患者外周血Helios+调节性T细胞的表达水平与血清中IL-10、TNF-α、TGF-β、IFN-γ炎症相关因子的浓度及肺功能的相关性。 结果:(1)与不吸烟健康人相比，吸烟肺功能正常者Helios+调节性T细胞比例升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）;与不吸烟健康人相比，COPD患者的外周血中Helios+调节性T细胞比例明显升高，差异具有统计学意义(P＜0.01);与吸烟肺功能正常者相比，COPD患者的外周血中Helios+调节性T细胞表达比例无明显差异。(2)与不吸烟健康人对比，吸烟肺功能正常者血清中TNF-α表达水平升高，差异有统计学意义（P＜0.05），TGF-β表达水平降低，差异有统计学意义（P＜0.05），IL-10、IFN-γ表达水平无明显变化，差异无统计学意义（P＞0.05）;与不吸烟健康人对比，COPD患者血清中IL-10、TNF-α及IFN-γ的表达水平升高，TGF-β的表达水平降低，差异有统计学意义（P＜0.05）;与吸烟肺功能正常者相比，COPD患者血清中IL-10的表达水平升高，差异有统计学意义（P＜0.05），TNF-α、IFN-γ和TGF-β表达水平无显著差异（P＞0.05）。(3)相关性分析结果显示，COPD患者外周血Helios+调节性T细胞的比例与血清中IL-10、TNF-α、TGF-β和IFN-γ水平呈正相关(r=0.71、0.53、0.80、0.54，P＜0.05);与肺功能相关分析结果显示，COPD患者外周血Helios+调节性T细胞的比例与FEV1％pred呈负相关关系(r=-0.61，P＜0.05)，而与FEV1/FVC、吸烟指数无明显相关性（r=-0.37、-0.15，P＞0.05）。 结论:稳定期慢性阻塞性肺疾病外周血中Helios+调节性T细胞表达升高，与炎症相关因子存在正相关关系，与肺功能FEV1％pred呈负相关，提示Helios+调节性T细胞可能参与了慢性阻塞性肺疾病的发生发展。