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精子生物学研究技术的快速发展,为保护野生濒危物种和经济动物的人工繁殖提供了重要手段,也为在生产实践中的应用打下了基础。本文对淡水鱼的精子运动以及在有机磷农药急性毒性检测中的应用进行了初步研究。 首先,本文探讨了环境因素对玫瑰无须鲃(Puntius conchonius)精子运动特性的影响。研究发现:(1)无论是水还是低渗的电解质(NaCl、KCl)和非电解质(二甲基亚砜、乙二露、甘露醇)溶液,均能激发精子的运动,说明玫瑰无须鲃精子运动属于低渗调节类型;(2)在不同渗透压的溶液中,精子吸水被激活0.25min后,随着溶液中渗透压的升高,精子运动百分率逐渐升高,运动时间逐渐延长,在渗透压为120-180 mosmol Kg-1时,精子运动百分数和运动时间都达到最大,随后再随着渗透压的升高,精子启动运动百分数逐渐降低,运动时间逐渐缩短,直到在渗透压为300 mosmol Kg-1的溶液中,精子停止运动;(3)K+不影响玫瑰无须鲃的精子运动,而浓度较高的Ca2+(10-15 mM)可抑制玫瑰无须鲃的精子运动;(4)在高渗透压(2.5％-20%)的DMSO或乙二醇溶液中,精子仍可以运动,且随着 DMSO或乙二醇浓度的升高即渗透压的升高,精子运动启动时间逐渐延长,精子最大激活比例逐渐降低,运动时间呈现开口向下的抛物线形式;(5)在相同渗透压的溶液中,玫瑰无须鲃精子运动启动百分数没有明显差异(p>0.05),在乙二醇溶液中的运动时间明显低于 NaCl和 DMSO溶液中(p<0.05)。 其次,研究了泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)精子运动特性,研究发现:(1)在精浆和鱼的生理溶液(FPS)中,泥鳅的精子不运动,高浓度(10-15 mM)的 Ca2+抑制泥鳅精子运动;(2)在高渗透压(2.5%-20%)的DMSO或乙二醇溶液中,精子仍可以运动,随着 DMSO或乙二醇浓度的升高即渗透压的升高,精子运动的启动时间逐渐延长,精子最大激活比例逐渐降低,运动时间呈现开口向下的抛物线形式;(3)在相同渗透压的溶液中,泥鳅精子在 DMSO和乙二醇溶液中的运动时间没有明显差异(p>0.05),都明显低于NaCl溶液中(p<0.05);得出结论:渗透压是影响淡水鱼精子运动的决定因素,精子细胞内外的渗透压差是精子运动启动的动力;高浓度的钙离子对精子运动有负面作用。 其三,用鲫鱼(Carassius auratus)精子作为靶细胞,研究了不同浓度的敌敌畏和氧化乐果对精子的体外生殖毒性。研究发现:随着有机磷农药(氧化乐果和敌敌畏)浓度的升高,精子运动时间逐渐缩短,速度越来越慢,运动轨迹也从直线变为弧线和曲线,又从曲线变为原地运动或不运动。由此可见,有机磷农药氧化乐果和敌敌畏具有明显的生殖毒性,且敌敌畏对鲫鱼的生殖毒性大于氧化乐果。