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细胞自噬是一种在进化上保守的溶酶体吞噬降解自身成分的胞内代谢途径,与肿瘤的发生及恶性进程密切相关。自噬对癌细胞恶性进程的影响与细胞微环境及上游信号调节通路密切相关,已有研究初步显示PKC家族的某些成员参与了细胞自噬的调控过程,但不同研究小组的研究结果尚存分歧,其作用有待于进一步探讨。 构建了稳定表达LC3蛋白的乳腺癌MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞模型,用于探索PKC家族成员PKCα、PKCθ和PKCδ在MDA-MB-231细胞自噬过程中的作用。研究发现,在饥饿诱导的乳腺癌MDA-MB-231细胞自噬过程中,过表达PKCα和PKCθ蛋白后都出现大量的GFP-LC3点状聚集,表明PKCα和PKCθ过表达细胞中自噬体的数量明显增多。由于自噬体的数量不仅受到自噬体形成速度的影响,也受到自噬体与溶酶体融合速度及自噬溶酶体降解速度的影响,因而采用Bafilomycin Al(BA)抑制溶酶体活性,进一步分析了在饥饿诱导细胞自噬的条件下,PKCα和PKCθ对细胞自噬过程的影响,结果表明LC3斑点数量增多且面积增大,揭示PKCα和PKCθ可能是通过促进自噬体形成来增强细胞的自噬水平。 研究还发现,与PKCα和PKCθ相似,PKCδ也可能是通过增加自噬体形成过程来增强饥饿诱导的自噬水平。另外PKCδ还具有一个特殊的现象,在未经饥饿诱导时,细胞中也出现大量LC3斑点和LC3-Ⅱ水平增加等现象,采用BafilomycinAl(BA)抑制溶酶体活性,LC3斑点数量增多且面积变大,由此可以说明PKCδ可能还具有诱导细胞自噬发生的功能。这些结果都揭示了PKC家族在乳腺癌MDA-MB-231细胞自噬过程中起着十分重要的作用,但不同家族成员可能起不同作用,其具体机制还有待于进一步研究。