【摘 要】
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弯曲度是羊毛重要的经济性状之一。前人研究结果显示,EDA/EDAR信号通路参与小鼠、人等毛囊生长发育,对毛发弯曲的形成有重要作用。但目前有关EDA/EDAR对绵羊毛发的生长发育和弯曲作用研究甚少。胰岛素样生长因子结合蛋白5（Insulin-Like Growth Factor Binding Proteins 5,IGFBP5）是第一个被鉴定出作为小鼠毛发弯曲分子标记的蛋白。课题组前期研究发现认为
【基金项目】
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山西省自然科学基金（201701D121106）；
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弯曲度是羊毛重要的经济性状之一。前人研究结果显示,EDA/EDAR信号通路参与小鼠、人等毛囊生长发育,对毛发弯曲的形成有重要作用。但目前有关EDA/EDAR对绵羊毛发的生长发育和弯曲作用研究甚少。胰岛素样生长因子结合蛋白5（Insulin-Like Growth Factor Binding Proteins 5,IGFBP5）是第一个被鉴定出作为小鼠毛发弯曲分子标记的蛋白。课题组前期研究发现认为IGFBP5也可以作为绵羊毛发弯曲的标记分子。为研究EDA/EDAR与羊毛弯曲形成的关系及其调控机制,本试验选取毛发性状差异较大的美利奴羊和本地绵羊作为研究对象,首先利用免疫组织化学、Western blot和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）等技术,分析EDA/EDAR和IGFBP5在两个不同品种羊背部皮肤的表达差异;其次分别构建EDA和EDAR过表达载体并转染绵羊角质形成细胞,检测过表达后其下游NF-κB和IGFBP5蛋白及mRNA表达水平的变化。试验结果如下:1.免疫组织化学结果显示,在美利奴羊背部皮肤中毛囊的毛基质、内外根鞘、皮脂腺和表层细胞中均可见EDA和EDAR免疫反应物;而在本地绵羊背部皮肤毛囊的毛基质、外根鞘以及皮脂腺中均可见EDA和EDAR免疫反应物。光密度分析结果显示,EDA和EDAR蛋白在美利奴羊背部皮肤组织中的相对表达量均显著高于本地绵羊。2.Western blot和qRT-PCR结果显示,EDA、EDAR和IGFBP5蛋白和mRNA在美利奴羊背部皮肤的表达水平均高于本地绵羊,均差异极显著（P<0.01）。3.绵羊角质形成细胞分别转染EDA和EDAR过表达载体后,Western blot和qRT-PCR结果表明,NF-κB和IGFBP5的蛋白和mRNA的相对表达量与空载对照组相比均有提高,均差异极显著（P<0.01）。结论:1.EDA和EDAR与羊毛弯曲呈正相关。2.EDA可能通过EDA-EDAR-NF-κB信号通路影响羊毛弯曲。3.EDA/EDAR通过正调控NF-κB和IGFBP5的表达,促进羊毛弯曲。
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