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目的: 为解决黔西北天麻共生萌发菌与蜜环菌菌种退化造成的天麻减产问题,本文从菌种选育和培养条件优化两个方向提高萌发菌与蜜环菌的品质,提高天麻产量与品质。 方法: 萌发菌选育与培养条件优化试验:首先对黔西北天麻栽培所用的GSF-8103、紫萁小菇和石斛小菇进行紫外线和硫酸二乙酯诱变,各筛选出3~5株优良突变株,测定天麻种子萌发率,最后探索长势最好、萌发率最高的优良突变株子实体诱导的温度、湿度与光照条件。黔西北野生萌发菌分离试验:即在黔西北地区有野生天麻生长而没有人工栽培史的试验点采集落叶撒播天麻种子,收集原球茎进行分离。蜜环菌选育与培养条件优化试验:首先用NH3·H2O、NaNO2和硫酸二乙酯对黔西北蜜环菌诱变,筛选3~5株优良突变株,然后对其生产种培养干料做不同含水量处理,测抗旱能力,最后将抗旱优良突变株接种到12种最常用的药用真菌培养基上筛选母种培养基。 结果: 萌发菌诱变选育与培养条件优化试验:紫外诱变效果明显好于硫酸二乙酯,各筛选出的3株优良突变株遗传性状稳定,GSF-8103、紫萁小菇和石斛小菇经30W紫外灯距30 cm分别诱变菌丝悬液3 min、2 min和12min得到天麻种子萌发率最高、萌发时间和满面天数最短的优良突变株,萌发率分别达到74.18%、69.15%、81.91%,比未经诱变菌株分别提高78.15%、54.04%和75.25%;紫萁小菇子实体生长速度和数量均大于GSF-8103和石斛小菇,三种萌发菌优良突变株子实体诱导合适的昼夜温度、相对湿度和光照强度均分别为21℃/15℃、95%和1000 lx。黔西北野生萌发菌分离试验:成功地收集到黔西北当地野生萌发菌所萌发的天麻原球茎,9个试验点中5个点有原球茎萌发。蜜环菌诱变选育与培养条件优化试验:NH3·H2O诱变效果最好,其次是NaNO2,DES诱变效果最差,最佳诱变条件为0.1%NH3·H2O-1,1%NH3·H2O-2,0.08NaNO2-1和0.5%NH3·H2O-0.5,筛选出4株菌索的平均生长速率大、分枝数多、密度大、萌发时间短、粗壮、色泽好的优良突变株,且各指标均能稳定遗传;抗旱试验结果表明,对于含水量最低的处理(培养干料∶水=1∶0.9),4个优良突变株均能萌发生长,整体分析得出,4个优良突变株均有一定的抗旱能力,0.1%NH3·H2O-1和1%NH3·H2O-2诱变条件下的优良突变株抗旱能力相对较好;蜜环菌抗旱优良突变株在马铃薯-葡萄糖-芝麻粉-玉米粉-KH2PO4-MgSO4、马铃薯-木屑-玉米粉-KH2PO4-MgSO4-VB1和葡萄糖-黄豆粉-马铃薯3种常用药用真菌培养基上生长状况最好。 结论: 紫外诱变对萌发菌是一种有效的诱变方式,能很大程度提高萌发菌生长速度和天麻种子萌发率;萌发菌子实体诱导过程中需要足够的温差、高湿的环境和一定的光照刺激;野生天麻生长点收集原球茎分离野生萌发菌方法可行,可作为野生萌发菌分离的一种有效手段推广到天麻种植;氨水诱变是蜜环菌的一种有效诱变方式;含水量过高会抑制蜜环菌的生长;葡糖糖和马铃薯是蜜环菌母种较为理想的碳源和氮源,添加玉米粉、芝麻粉、黄豆粉能使菌索更为粗壮,添加适量的无机盐可以加快菌索生长;萌发菌和蜜环菌的优良菌株可应用和推广到天麻人工栽培。