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试验目的：以延边黄牛为研究对象，寻求一种操作简单、相对无损伤、去核效率高的去核方法，从而为体细胞核移植效率的提高打下基础，为产业化生产提供理论依据。 试验方法：通过对两种不同的去核化学试剂的去核率和发育率的比较确立了脱羰秋水仙碱的可靠性和可行性。 试验结果： 1.在脱羰秋水仙碱的不同浓度（0μg/ml、0.3μg/ml、0.4μg/ml、0.5μg/ml、0.6μg/ml）去核率的比较实验中，0.3μg/ml和0.6μg/ml两种浓度去核率分别是61.29％和55.60%差异不显著，0.4μg/ml和0.5μg/ml两种浓度去核率分别是81.80%和83.33%差异不显著，但0.3μg/ml和0.6μg/ml与0.4μg/ml和0.5μg/ml两组之间去核率却差异显著（P﹤0.05），从而确定了0.4μg/ml和0.5μg/ml两种浓度是此化学去核试剂去核率的最佳浓度，并通过对供试卵母细胞Hoechst33342染色、荧光显微镜的观察，试验结果显示较适合延边黄牛体细胞克隆的化学去核率最佳浓度为0.4μg/ml。 2.为了确定脱羰秋水仙碱的最佳的激活后时间和最佳去核作用时间，在0.4μg/ml浓度下分别进行了p.a0min作用时间30min、60min、90min、120min和p.a30min作用时间为30min、60min、90min、120min和p.a60min作用时间为30min、60min、90min、120min和p.a90min作用时间为30min、60min、90min、120min和p.a120min作用时间为30min、60min、90min、120min通过Hoechst33342染色、荧光显微镜的观察，试验结果显示延边黄牛卵母细胞的最佳的激活后时间为90min,最佳去核作用时间为90min。 3.在延边黄牛卵母细胞卵龄对去核率的影响试验中，在脱羰秋水仙碱浓度0.4μg/ml最佳的激活后时间90min和最佳去核作用时间90min下，分别对18～20h,20～22h,22～24h卵母细胞卵龄做了去核率比较，其中18～20h和20～22h去核率差异不显著，与22～24h的去核率差异显著，所以试验选择20～22h的卵母细胞卵龄作为最佳试验卵龄。 4.在确定鬼臼亚乙苷的浓度试验中，分别对0μg/ml、25μg/ml、36μg/ml、50μg/ml、63μg/ml、75μg/ml浓度进行了去核率的试验，其中0μg/ml、25μg/ml差异不显著，25μg/ml、36μg/ml差异不显著，36μg/ml、75μg/ml差异不显著63μg/ml、75μg/ml差异不显著，50μg/ml去核率最高与其它各个浓度均差异显著，所以50μg/ml浓度是延边黄牛卵母细胞去核率的最佳浓度。 5.在鬼臼亚乙苷的作用时间试验中，对供试卵母细胞分别作用了0min时去核率为4.00%，60min时去核率为38%，90min时去核率为32.86%，120min时去核率为60.45%，150min时去核率为56.67%，180min时去核率为40%,其中60min、90min、180min之间差异不显著，120min、150min之间差异不显著且去核率最高，从而确立了鬼臼亚乙苷的最佳作用时间为120min。 6.在第六个实验中比较了两种化学去核试剂以及显微操作去核方法对重构胚发育率的影响，孤雌激活对照组囊胚发育率为37.98%，脱羰秋水仙碱的囊胚发育率为27.08%，鬼臼亚乙苷没能发育到囊胚，显微操作去核法囊胚发育率为17.87%，其中脱羰秋水仙碱和显微操作去核法的囊胚发育率和孤雌激活对照组囊胚发育率无显著差异。 试验结论：在延边黄牛体细胞核移植化学诱导去核方法研究试验中，分别应用了脱羰秋水仙碱和鬼臼亚乙苷两种试剂，结果显示脱羰秋水仙碱不仅在去核率上达到最高并且重构胚的囊胚发育率也是最佳的，所以脱羰秋水仙碱是一种适合延边黄牛体细胞克隆的有效的化学去核试剂。