【摘 要】
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目的：探讨蛋白精氨酸甲基转移酶6（protein arginine methyltransferase6，PRMT6）在小鼠睾丸组织中的表达特征，研究 PRMT6是否受到雄激素及雄激素受体（androgen receptor，AR）的调控，以及
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目的：探讨蛋白精氨酸甲基转移酶6（protein arginine methyltransferase6，PRMT6）在小鼠睾丸组织中的表达特征，研究 PRMT6是否受到雄激素及雄激素受体（androgen receptor，AR）的调控，以及研究PRMT6的相关功能。 方法：运用反转录PCR、实时荧光定量PCR及蛋白质免疫印迹技术，研究Prmt6在小鼠睾丸中的表达特征；通过睾丸组织免疫荧光染色技术和在细胞中转入pEGFP-C1-PRMT6融合质粒探讨PRMT6的亚细胞定位；运用双荧光素酶实验分析Prmt6的启动子活性是否受到AR的调控；在TM4细胞内转入Ar的干扰RNA siAr或Ar的过表达质粒pcDNA3.1-Ar，以观察AR是否调控Prmt6的表达；将Prmt6的干扰质粒 shRNA转入生殖细胞系中，并用细胞划痕实验及流式细胞技术探讨Prmt6对生殖细胞迁移和凋亡的影响。 结果：PCR与蛋白印迹结果显示，与野生型（wild type，WT）小鼠相比，PRMT6在AR敲除（androgen receptor knockout，ARKO）小鼠中的表达水平升高，且在1-8周WT小鼠睾丸中的表达随年龄增长有下降趋势；睾丸组织免疫荧光结果显示在1-8周小鼠睾丸内 PRMT6主要定位于精原、精母细胞的细胞核内， EGFP-PRMT6绿色荧光蛋白同样也定位于TM4和COS7细胞的细胞核内；通过荧光素酶实验，我们发现在雄激素及AR处理的细胞中，Prmt6的转录受到抑制；当在TM4细胞中转入siAr或pcDNA3.1-Ar时，Prmt6的表达相应的增加或减少。划痕和流式细胞分析证明，用shPrmt6敲低Prmt6的表达可以抑制精原、精母细胞的迁移并促进其凋亡。 结论：PRMT6主要表达于小鼠睾丸的精原细胞和精母细胞内，其可受AR的调控而表达下降，并在生殖细胞中促进细胞的迁移及抑制细胞的凋亡，其在精子发生中可能具有重要作用。
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