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目的：利用高浓度棕榈酸条件下培养的小鼠胰岛素瘤细胞株β—TC3细胞作为细胞脂性凋亡模型，观察游离脂肪酸(FFA)对胰岛β细胞凋亡的影响及其与PANDER的关系，并观察GLP-1对胰岛β细胞脂性凋亡的干预作用，以及对PANDER表达的影响，探讨其可能的拮抗胰岛β细胞脂性凋亡的机制。
方法：①β—TC3细胞以PRMI-1640完全培养液、37℃、5％CO2条件下培养；每3-4天换液1次，约每周传代1次。按实验要求进行分组处理。②分组：β—TC3细胞分为3组：(1)空白对照组，(2) PA处理组(0.5mmol/L PA)，(3)PA+GLP-1处理组(0.5mmol/L PA，10nmol/L GLP-1)，培养24小时后进行检测。另外以不同浓度的PA处理β—TC3细胞24小时后进行检测。③细胞凋亡的检测：各组细胞均分别以MTT法、Annexin—V/PI荧光染色流式细胞术检测(FACS)、Tunel荧光染色计数，定性检测细胞凋亡。并以MTT法测定不同浓度PA处理24小时后的β—TC3细胞的存活率。④PANDER mRNA表达：提取细胞总RNA，纯化、定量后，以实时荧光定量PCR法测定各组PANDER mRNA的水平。
结果：⑴PA对胰岛β细胞的存活率具有剂量依赖性抑制作用：MTT法测定显示β细胞经过不同浓度的PA处理后，细胞存活率下降，并且随着PA浓度升高，细胞存活率呈逐渐下降趋势。相关分析显示，细胞活性与PA浓度呈负相关，其相关系数为—0.844(P<0.05)。当PA浓度0.25mmol/L时，β—TC3细胞存活率开始出现显著下降(83.83％±4.08％，vs空白对照P<0.05)，当PA浓度为1.0mmol/L时，细胞存活率更进一步下降(63.33％±12.27％，vs空白对照组P<0.01)。⑵GLP-1拮抗PA引起的胰岛β—TC3细胞存活率下降：设定空白对照组的存活率为100.00％±0.00％，MTT法测定显示PA组的存活率87.01％±6.05％，PA+GLP-1组的存活率98.33％±9.83％。PA组的细胞存活率明显低于空白对照组(P<0.05)，而PA+GLP-1组的细胞存活率与空白对照组无明显差异(P>0.05)，但显著高于PA组(P<0.05)。⑶PA对胰岛β—TC3细胞凋亡的影响以及GLP-1对其的拮抗：Annexin—V/PI双标流式测定显示空白对照组的凋亡率为18.20％±2.14％，PA组的凋亡率为52.73％±3.29％，PA+GLP-1组的凋亡率为34.49％±1.57％，PA组的凋亡率比空白对照组增高2.5倍(P<0.05)，PA+GLP-1组的凋亡率显著比PA组低(P<0.05)。Tunel法定性检测凋亡显示，PA组的凋亡细胞数量比空白对照组明显增多，PA+GLP-1组的凋亡细胞数量比PA组低。⑷PANDER mRNA表达水平的变化：采用Delta—delta Ct法计算各个样品F值，并以F值表示mRNA表达水平，F值越低，说明mRNA表达水平越高。设定本实验空白对照组的F值为1.00％±0.00％，则PA组的F值为0.16％+0.16％，PA+GLP-1组的F值为2.01％±0.46％，与空白对照组比较，PA组的F值明显降低(P<0.05)，PA+GLP-1组的F值比PA组明显升高(P<0.05)，而与空白对照组没有差异。
结论：①FFA呈剂量依赖性诱导胰岛β细胞凋亡，GLP-1具有拮抗FFA致胰岛β细胞凋亡的作用。②FFA在诱导胰岛β细胞凋亡的同时刺激胰岛β细胞PANDER这一胰岛内源性致凋亡因子的表达，GLP-1对FFA此一作用同样具有抑制作用。③PANDER可能是胰岛β细胞脂性凋亡信号通道中重要的介质。