【摘 要】
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该研究以Pm4a近等基因系Yuma/8*Cc和Chancellor(Cc)为材料,利用根据抗病基因产物保守序列设计的6对简并引物,进行RT-PCR扩增,获得5个在抗感材料间有多态性的片段W2、W4、W6、
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该研究以Pm4a近等基因系Yuma/8*Cc和Chancellor(Cc)为材料,利用根据抗病基因产物保守序列设计的6对简并引物,进行RT-PCR扩增,获得5个在抗感材料间有多态性的片段W2、W4、W6、W8和W490,其长度分别为1121 bp、833 bp、613 bp、406 bp和450 bp.W490是用白粉菌诱导后的cDNA扩增出的产物.序列分析表明W8与大麦的H<+>-ATP酶基因Hal高度同源,W2编码的氨基酸序列与拟南芥中的一个O-linked GlcNAc转移酶(OGT)高度相似.W4和W6是单引物扩增产物,与己知序列无同源性.由W490序列推导的氨基酸序列与类丝氨酸/苏氨酸激酶(STK)有很高的相似性.根据W8序列,采用RACE PCR技术获得了一个小麦H+-ATP酶基因的全长cDNA序列,长3330 bp,编码区长2856 bp,共编码951氨基酸.这是第一个克隆的小麦跨膜质子泵类似基因,命名为Thal.采用cDNA-IPCR的方法获得了包括完整3端在内的两个OGT部分cDNA(EST),一个长1603 bp,一个长1846 bp.Southern杂交表明在小麦基因组中W2和W490以单或寡拷贝形式存在.利用中国春的一套缺体-四体系列将W2定位于4A染色体.RNA点杂交表明OGT类似基因与小麦的抗白粉病过程有关.
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