广西茉莉花茎糖类的提取分离及抗氧化活性研究

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目的:本实验以广西茉莉花茎为研究对象,对其中的糖类化合物进行提取和分离,研究其抗氧化活性。  方法:  (1)广西茉莉花茎糖类化合物的提取:将广西茉莉花茎洗净烘干粉碎后,并用超声提取其中的糖类化合物。用葡萄糖为标准品绘制的葡萄糖标准曲线并测试广西茉莉花茎糖类化合物的含量。以液料比、提取温度、超声功率和作用时间这4个因素为正交因素水平,以多糖提取率为衡量标准,按L9(34)正交表进行正交实验确定超声提取广西茉莉花茎糖类化合物的最佳提取工艺。  (2)广西茉莉花茎糖类化合物的纯化、分离及结构鉴定:广西茉莉花茎粗多糖经Sevag法5次脱蛋白后,分别以上样溶液pH、吸附时间、上样流速、上样浓度和解吸流速等因素考察AB-8和H103两种大孔吸附树脂的脱色率。经过脱色后的广西茉莉花茎多糖再由HPLC确定分离条件并由半制备液相色谱分离制备单体,并通过波谱综合解析来进行单体的结构鉴定。  (3)单体化合物的抗氧化性研究:通过对四种单体的抗氧化实验测定四种化合物对DPPH自由基、超氧自由基O2-·和羟基自由基·OH的清除能力,对Fe3+的还原能力以及对Fe2+的螯合能力,来衡量这四种单体的抗氧化能力。  结果:  (1)通过正交实验超声提取广西茉莉花茎糖类化合物的最佳提取工艺条件为液料比(mL/g)为35∶1,提取温度为50℃,提取功率为180W,提取时间为40min。在最佳提取工艺条件下多糖的平均得率为6.02%。  (2)通过对两种大孔吸附树脂的比较,我们选择AB-8大孔吸附树脂对经过脱蛋白处理好的茉莉花茎粗多糖进行脱色,得到的精制多糖经过HPLC优化分离条件后,使用制备型液相色谱进行分离制备,并得到四种单体GXMLH-1(21mg),GXMLH-2(108mg),GXMLH-3(45mg),GXMLH-4(28mg)。通过波谱综合解析并参考文献,确定四种单体化合物分别为Molihuaside A、Sambacoside A、Sambacoside F和Cycloolivil(环橄榄树脂素)。  (3)四种化合物DPPH、超氧自由基O2-·和羟基自由基·OH均有较好的清除作用,对Fe3+的还原能力以及对Fe2+的螯合能力也较为理想。  结论:通过对广西茉莉花茎多糖的抗氧化活性研究,初步确定4种化合物的抗氧化能力和剂量之间存在着正相关关系,其抗氧化效果较为理想,但是抗氧化能力各有差异。
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