论文部分内容阅读
TRAIL是新发现的TNF超家族成员，能诱导肿瘤细胞、转化细胞或病毒感染细胞凋亡，而对正常细胞没有杀伤作用。因其能选择性杀伤肿瘤细胞而成为近年来研究较多的潜在的化疗药物之一，但也有很多肿瘤细胞对TRAIL的细胞毒性耐受。本实验研究发现化疗药物8-氯腺苷(8-Cl-Ado)和放线菌素D(Act D)可以增强肿瘤细胞对重组可溶性TRAIL(rsTRAIL)的敏感性，促进肿瘤细胞凋亡。 首先，我们发现亚毒性剂量的8-Cl-Ado可增强肝癌细胞BEL-7402对rsTRAIL的敏感性，促进肿瘤细胞凋亡，并且呈作用时间和rsTRAIL浓度依赖性。进一步研究发现rsTRAIL和8-Cl-Ado联合作用，使肿瘤细胞出现G1期阻滞，细胞凋亡增加。二者联合作用还可促进肿瘤细胞表面死亡受体DR5的表达，并下调假受体DcR1(decoy receptor 1)的表达。在受体介导的信号传导途径研究中发现，rsTRAIL和8-Cl-Ado联合作用可激活caspase依赖的和非依赖的两条凋亡信号传导途径。该联合作用还可抑制转录因子NF-κB的活性，抑制细胞凋亡。 对rsTRAIL耐药的神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y先用亚毒性剂量的Act D处理，再用rsTRAIL处理，可促进该肿瘤细胞凋亡，其凋亡率随着rsTRAIL的作用浓度增加而增加。Act D预处理使细胞线粒体膜电位下降，加入rsTRAIL后，可使细胞线粒体内参与细胞凋亡的分子，如：ROS和AIF等释放，介导caspase非依赖的细胞凋亡途径；同时还可活化caspase-9及其下游的caspase-7，激活caspase依赖的细胞凋亡途径。在细胞凋亡途径中，Bcl-2家族抗凋亡分子Bcl-2和Bcl-X_L表达下调，可能与细胞线粒体膜电位下降相关。采用RNAi技术抑制Bcl-X_L表达不能增加细胞对rsTRAIL的敏感性，提示Bcl-X_L不是SH-SY5Y细胞对rsTRAIL耐药的关键因子。 根据以上实验结果可得出如下结论，8-Cl-Ado和Act D可增强肿瘤细胞对rsTRAIL的敏感性，促进肿瘤细胞凋亡，甚至可使对rsTRAIL耐受的肿瘤细胞变成敏感细胞。rsTRAIL和化疗药物联合作用，可通过上调死亡受体表达、降低线