发酵红景天抗氧化活性研究

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背景及目的近年来,随着科学技术的迅猛发展,人们发现90%以上的疾病都与活性氧和自由基密不可分。红景天(Rhodiola rosea)属于景天科(Crassulaceae)景天亚科(SEDOIDEAE BERGER),红景天属(Rhodiola L)。红景天主要生长在欧洲,亚洲尤其西伯利亚及北美洲的高寒地带。在亚洲至少有20多种红景天应用在传统医疗系统中,主要包括库页红景天(R. sachalinensis)、互生红景天(R. alterna)、大花红景天(R.crenulata)、宽狭叶红景天(R. kirilowii)、小叶红景天(R. rosea)、四裂红景天(R. Quadrifida)、长毛圣地红景天(R. sacra)。含有黄酮、红景天苷、多糖等多种功能性成分和矿物质元素,营养价值高,深受人们喜爱。近几年来,国内外学者通过大量研究证实:红景天具有抗疲劳、抗肿瘤、增强机体免疫力,抗氧化等作用,但尚未见活性酵母发酵红景天成分的抗氧化作用研究。本实验通过对活性酵母发酵红景天体内外抗氧化作用的研究,筛选出抗氧化作用最强的功能性的发酵条件,为红景天保健功能的开发利用提供理论依据。方法①红景天根茎切块,60℃烘干,粉碎,过60目筛。称取200g红景天粗粉末提取发酵(活性酵母)与未发酵红景天提取物。②体外实验,采用DPPH自由基清除能力、氧自由基吸收能力(ORAC)、细胞内抗氧化活性(CAA)实验,筛选出最优抗氧化能力的功能性。③体内实验,取小鼠90只,随机分空白对照组、模型组、阳性对照组、发酵红景天低、中、高剂量组,未发酵红景天低、中、高剂量组,每组10只。分别按200mg/kg·BW、400mg/kg·BW、800mg/kg·BW剂量灌胃给药,每天一次;空白对照组和模型组每天灌胃dH2O0.1mL/10mg·BW,阳性对照组每天灌胃Vit C10mg/kg·BW,连续30d。末次灌胃后,除空白对照组外其余8组禁食水16h(过夜),然后1次性灌胃,给予50%乙醇12mL/kg·BW,恢复小鼠自由摄食饲料和自来水。6h后小鼠眼球取血取上清液,采用酶联免疫吸附法(ELISA),检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)的活性,蛋白羰基(PCO)、8-表氢氧异前列腺素(8-iso-PGF2α)的含量及血红素氧合酶-1(HO-1)、NADPH醌氧化还原酶(NQO-1)的表达,小鼠核因子E2相关因子2(Nrf2)。结果①DPPH自由基清除能力结果显示:发酵红景天、未发酵红景天组清除DPPH·活性明显高于发酵复方红景天、未发酵复方红景天、发酵人参、未发酵人参组(P<0.01);发酵红景天组清除DPPH·活性明显高于未发酵红景天组(P<0.01或P<0.05);发酵复方红景天、未发酵复方红景天、发酵人参、未发酵人参组对DPPH·的清除能力差异无统计学意义(P>0.05)。发酵红景天的IC50值为80.968μ g/mL,未发酵红景天的IC50值为158.830μg/mL,两者比较差异具有统计学意义(P<0.05),且两者的IC50值均大于抗环血酸组40.00±0.01μg/mL,(P<0.01)。②氧自由基吸收能力结果显示:发酵红景天组的氧自由基吸收能力明显高于未发酵红景天组,发酵复方红景天、未发酵复方红景天组与发酵人参、未发酵人参组(P<0.01)。发酵复方红景天、未发酵复方红景天组与发酵人参、未发酵人参组氧自由基吸收能力比较,无显著性差异(P>0.05)。③细胞内抗氧化活性实验结果显示:发酵红景天与未发酵红景天组各浓度剂量组的细胞荧光强度与空白组比较,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05);发酵复方红景天与未发酵复方红景天150μg/mL、200μg/mL、250μg/mL浓度剂量组与空白组比较差异具有统计学意义(P<0.05)发酵人参与未发酵人参组各浓度剂量组与空白组比较均无有统计学意义(P>0.05)。发酵红景天组抑制ROS氧化DFCH的能力最强(P<0.05)。④发酵红景天低、中、高剂量组,GSH活性均显著高于模型组(P<0.05或P<0.01)。⑤发酵红景天低、中、高剂量组,PCO、8-iso-PGF2α含量均显著低于模型组(P<0.05或P<0.01)。⑥发酵红景天低、中、高剂量组,SOD、HO-1、NQO-1表达均显著高于模型组(P<0.05或P<0.01)。⑦发酵红景天高剂量组与阳性对照组比较,PCO、8-iso-PGF2α含量、SOD、HO-1、NQO-1、Nrf2表达,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论①发酵红景天、未发酵红景天提取物均具有抗氧化活性,发酵红景天抗氧化活性明显优于未发酵红景天。②发酵红景天能够增强抗氧化酶活性,减少体内蛋白质氧化损伤、脂质氧化损伤,促进抗氧化蛋白表达,激活Nrf2通道。
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