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目的:1.研究皖产大宗药材茯苓趁鲜加工与炮制生产一体化关键技术,重点解决茯苓在产地加工时,苓农由分散加工引起的茯苓饮片质量参差不齐的问题,确保茯苓饮片加工工艺稳定、可控,从而提升茯苓饮片的质量;2.优选茯苓饮片产业化生产工艺技术参数,解决机械切制引起的饮片成型率低的问题,建立茯苓饮片产业化生产关键技术操作规程及茯苓饮片产地加工与炮制一体化的产业化生产模式;3.建立并健全茯苓质量控制体系,为茯苓产地加工与炮制生产一体化生产工艺提供支撑,为茯苓质量综合评价提供依据;4.对优选的茯苓丁加工工艺与传统加工工艺进行药效学研究,探索茯苓丁的最佳炮制工艺及临床应用依据。方法:1.采用紫外分光光度法,以葡萄糖、茯苓酸为对照品,测定茯苓中茯苓多糖、总三萜的含量;采用高效液相色谱法,测定茯苓饮片中猪苓酸C、去氢茯苓酸、茯苓酸的含量。2.通过市售茯苓饮片质量分析及对茯苓混乱的加工方式进行跟踪调研,系统考察茯苓药材不同加工方式如趁鲜去皮、发汗去皮、趁鲜蒸制去皮、发汗蒸制去皮、切制、干燥等加工环节,寻找影响茯苓饮片质量的主要因素。3.以茯苓多糖、总三萜、猪苓酸C、去氢茯苓酸、茯苓酸为质量评价指标,结合饮片的外观性状及成型率,采用正交设计法优选出最佳加工模式,确定茯苓饮片关键技术参数,并通过中试生产及指纹图谱技术研究,建立茯苓饮片产业化生产关键技术操作规程(SOP)。4.采用水负荷模型法及代谢笼法研究不同炮制工艺茯苓丁对大鼠利尿作用的影响;采用大黄法、力竭法及饥饿法三因素复合法复制脾气虚证模型研究不同炮制工艺茯苓丁对脾虚症大鼠影响。结果:1.建立了茯苓饮片产地加工与炮制一体化的产业化生产模式,茯苓片的产业化生产工艺为:将刚采挖的鲜茯苓,发汗至茯苓表面褐色,去皮后表面赤色较少时去皮(即发汗3天去皮),切成4mm厚度的片,阴2天后,放入鼓风干燥箱,用铁架网压住(要有一定重量),50℃烘干。茯苓丁的产业化生产工艺为:将刚采挖的鲜茯苓去皮,放入蒸锅中蒸制90min后趁茯苓菌核表面水分未干时去皮,切成厚度8mm、宽度8mm的丁,阴2天后,放入鼓风干燥箱,50℃烘干。2.建立了以茯苓多糖、总三萜、猪苓酸C、去氢茯苓酸、茯苓酸为质量控制指标,结合外观性状、饮片成型率,综合控制茯苓饮片质量的方法。其中外观性状、有效成分及成型率的权重系数分别为0.3、0.5、0.2,茯苓多糖、总三萜、茯苓酸、去氢茯苓酸和猪苓酸C的权重系数分别定为0.1、0.1、0.1、0.1,隶属度=(指标值-指标最小值)/(指标最大值-指标最小值),综合分数=个指标隶属度与权重系数乘积之和。该方法精确稳定,能有效控制茯苓的质量。3.建立了市售茯苓饮片的指纹图谱,通过指纹图谱相似度分析,市售茯苓饮片相似度在31.1%~99.2%之间,进一步说明市售茯苓饮片质量参差不齐;建立了茯苓饮片加工工艺的指纹图谱,茯苓片工艺饮片的相似度在98.9%~99.7%之间,茯苓丁工艺饮片的相似度在96.5%~98.8%之间。指纹图谱技术验证了茯苓饮片加工工艺的重现性好、稳定性高。4.不同炮制工艺茯苓丁在利尿和健脾方面存在一定药效学差异,茯苓丁新工艺组利尿效果强于茯苓丁传统工艺组,茯苓丁新工艺组较传统组药吸收效果好,但没有显著性差异。结论:1.建立的茯苓质量控制方法和综合评分法,结合外观性状、饮片成型率全面评价茯苓饮片的质量,为茯苓一体化工艺的优选提供依据;2.茯苓饮片产地加工与炮制一体化生产工艺,与传统工艺相比,以机械代替手工切制,省时、省力;3.优化的茯苓片、茯苓丁产业化生产工艺科学、合理,提高了饮片的成型率,饮片的加工工艺规范化、产业化,保证了饮片质量稳定可控,为茯苓饮片产业化生产提供依据;4.建立的指纹图谱方法稳定,可以用于茯苓片、茯苓丁饮片的质量控制;5.建立的水负荷模型大鼠利尿试验和大鼠脾虚模型健脾试验方法科学、合理、可行,为茯苓饮片的临床应用提供依据。