花粉介导的几丁质酶基因及GUS基因对棉花遗传转化的研究

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该研究以棉花远缘杂交高代材料海208、海209为受体,以质粒pAHG11及pBI121为供体,在0.3M的山梨醇溶液中,用花粉与质粒DNA混合,应用JY92-Ⅱ型超声波细胞粉碎仪进行超声波处理,然后辅以人工授粉的方法将外源基因导入到受体中.经PCR、PPT涂抹及GUS组织化学定位检测初步证明,几丁质酶基因及报告基因GUS已整合到棉花的基因组中.目前已获得52株转基因T<,1>代值株,转化率为32﹪.该实验所得结果表明:利用棉花花粉可以介导外源基因的转化,并建立了高频转化体系.利用花粉作为载体介导外源基因的转化,避免了传统的基因枪法和农杆菌介导法转化所要求的组织培养技术,转化方法简单、易操作,具有很强的实用性.
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