论文部分内容阅读
目的:研究缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注后缺血脑组织白细胞介素-6(IL-6)、细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)表达的影响,探讨缺血后处理对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法:将140只雄性SD大鼠随机分为假手术组(40只)、缺血再灌注组(50只)、缺血后处理组(50只),每组分7个观察时间点,分别为缺血再灌注术后3h、6h、12h、24h、48h、72h、7d,每个时间点5只大鼠。假手术组于术后24h取5只大鼠行TTC染色,再灌注组与后处理组于缺血90min再灌注24h、72h、7d 3个时间点各取5只大鼠行TTC染色计算脑梗死体积。采用改良线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血后处理组在实现再灌注之前给予灌注15s/缺血15s,反复3个循环,假手术组不插入栓线。术后各时间点进行神经功能评分。干湿重法测定各组大鼠不同时间点脑组织含水量。酶联免疫吸附(ELISA)法测定各组大鼠不同时间点脑组织IL-6含量。TTC染色法计算脑梗死体积。HE染色病理切片观察不同时间点脑梗死组织病理改变。荧光定量PCR法测定不同时间点脑组织SOCS-3mRNA的表达量。结果:1.神经功能评分变化:缺血再灌注组在术后3h～7d的神经功能评分显著低于各相应时间点的假手术组(P<0.05);在缺血再灌注组各时间点中,以24h神经功能评分最低,其它各时间点与此相比具有显著性差异(P<0.05)。缺血后处理组在3h～7d的神经功能评分显著低于各相应时间点的假手术组(P<0.05);在12h～7d的神经功能评分显著高于各相应时间点的缺血再灌注组(P<0.05)。2.脑组织含水量变化:缺血再灌注组在6h～7d的脑组织含水量显著高于各相应时间点的假手术组(P<0.05);在缺血再灌注组各时间点中,脑组织含水量在术后6h升高,24h达峰值,其它各时间点与此相比具有显著性差异(P<0.05),之后开始下降,至7d时仍未恢复正常水平(P<0.05)。缺血后处理组在6h～72h的脑组织含水量显著高于各相应时间点的假手术组(P<0.05);在6h～7d的脑组织含水量显著低于各相应时间点的缺血再灌注组(P<0.05)。3.脑组织IL-6含量:缺血再灌注组在3h～7d的IL-6含量显著高于各相应时间点的假手术组(P<0.05);在缺血再灌注组各时间点中,脑组织IL-6含量在术后3h升高,24h达峰值,其它各时间点与此相比具有显著性差异(P<0.05),之后开始下降,至7d时仍未恢复正常水平(P<0.05)。缺血后处理组在6h～72h的脑组织IL-6含量显著高于各相应时间点的假手术组(P<0.05);在6h～48h的脑组织IL-6含量显著低于各相应时间点的缺血再灌注组(P<0.05)。4.脑梗死体积测定:假手术组无梗死灶出现;缺血再灌注组中脑梗死体积以72h最大,24h、7d与此相比具有显著性差异(P<0.05);缺血后处理组在24h、72h、7d的脑梗死体积显著低于各相应时间点的缺血再灌注组(P<0.05)。5.脑组织病理改变:假手术组未见明显病理损害表现。缺血再灌注组呈典型的缺血性改变:缺血区染色明显变淡,神经元和胶质细胞明显减少,细胞空泡样变性,胞核固缩呈三角形,核仁消失,细胞周围明显肿胀,炎性细胞浸润,后期伴有胶质细胞增生。缺血后处理组与缺血再灌注组比较,神经细胞坏死、细胞水肿、炎性细胞浸润程度均低于缺血再灌注组。6.脑组织SOCS-3mRNA的表达变化:缺血再灌注组在3h～72h的脑组织SOCS-3mRNA表达量显著高于各相应时间点的假手术组(P<0.05);在缺血再灌注组各时间点中,SOCS-3mRNA的表达量以术后24h最高,其它各时间点与此相比具有显著性差异(P<0.05),之后逐渐下降,至7d已无统计学意义。缺血后处理组在3h～72h的脑组织SOCS-3mRNA表达量显著高于各相应时间点的假手术组(P<0.05);在12h～72h的脑组织SOCS-3mRNA表达显著高于相应各时间点的缺血再灌注组。结论:1.改良的大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,制作方法简单,易于操作,重复性好,与人脑缺血再灌注病理生理变化基本一致,是一种研究脑缺血再灌注损伤较为理想的动物模型。2.脑缺血再灌注后出现脑组织含水量增加,脑组织缺血性病理改变,神经功能障碍及IL-6、SOCS-3表达升高,SOCS-3可能通过抑制IL-6的表达,减轻缺血再灌注损伤,具有内源性神经保护作用。3.缺血后处理能改善缺血再灌注后神经功能损害,减轻脑水肿及病理损害,减小脑梗死体积,从而具有脑保护作用。4.缺血后处理可能通过抑制IL-6的产生,上调SOCS-3表达,减轻炎性细胞浸润等多种途径,发挥神经保护作用。