【摘 要】
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黄曲霉毒素是黄曲霉菌属黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生的二次代谢产物,毒性大,理化性质稳定,是目前发现的化学致癌物中最强的物质之一。黄曲霉毒素的危害主要是由于人或动物食用
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黄曲霉毒素是黄曲霉菌属黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生的二次代谢产物,毒性大,理化性质稳定,是目前发现的化学致癌物中最强的物质之一。黄曲霉毒素的危害主要是由于人或动物食用被黄曲霉毒素污染的食物。在天然污染的食品中以黄曲霉毒素B1最为多见,其毒性和致癌性也最强。对于这一污染的预防是非常困难的,而且黄曲霉毒素Bl的半数致死量仅为0.36毫克/公斤体重,属特剧毒的毒物范围。而目前对于含黄曲霉毒素浓度较低的粮食和食品的检测还有诸多问题,已经远不能满足现代检测要求。综合国内外发展现状,以抗黄曲霉毒素单克隆抗体为基础的免疫技术在黄曲霉毒素的检测工作中因准确快捷而独占优势。本文以AFB1-BSA(aflatoxin B1-BSA,黄曲霉毒素B1和BSA偶联物)为免疫原免疫小鼠,获得了较好的免疫应答。然后通过单克隆抗体技术获得了2株能够较好分泌抗体的杂交瘤细胞株,分别编号为AA-1和AA-2;应用小鼠体内培养法扩大生产单克隆抗体,每株细胞株获得约50ml腹水,效价分别为1.6×105和8×104;通过试剂盒测得两株抗体重链亚型均为IgG1,轻链亚型均为Lambda;腹水经过纯化后纯度较高;该抗体针对AFB1和AFB2的灵敏度分别为0.26μg/ml和58μg/ml,交叉反应率分别为100%和0.45%。本实验通过大量筛选制备所得的抗黄曲霉毒素Bl的单克隆抗体具有较好的特异性,为黄曲霉毒素的检测提供了技术支持。
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