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1目的肺癌是危害人类健康的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率极高,且在老年人群中高发。近年来,多项研究表明肺癌的发生、发展不仅与原癌基因的激活、抑癌基因的失活导致细胞增生过度和分化异常有关,还与细胞凋亡异常有关。PDCD5是人程序化死亡因子5,Survivin是生存蛋白。研究表明PDCD5是凋亡促进基因,Survivin是凋亡抑制基因。通过凋亡相关基因PDCD5、Survivin在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况及相关性的研究,来探讨PDCD5、Survivin的临床生物学意义及NSCLC的发病机制,为NSCLC的早期诊断、治疗提供实验依据。2对象与方法2.1研究对象收集郑州大学第一附属医院病理科2008年1月-2009年11月间胸外科手术切除并经病理证实为NSCLC的肺癌组织标本60例作为实验组,同时取20例NSCLC癌旁正常肺组织(即距肿瘤边缘大于3cm并经病理证实为正常的肺组织)作为对照组。所有入选的肺癌病人术前均未接受任何抗肿瘤治疗。2.2实验方法采用免疫组化S-P法检测PDCD5、Survivin在肺腺癌、肺鳞癌及癌旁正常肺组织中的表达情况。采用TUNEL法检测凋亡细胞,计算凋亡指数AI。2.3结果判定标准2.3.1 PDCD5、Survivin的阳性结果判定标准在20×10高倍视野下,随机选取5个有阳性细胞存在的视野进行计数,每个视野计数100个细胞,共500个细胞。PDCD5以细胞浆内出现棕黄色颗粒,Survivin以胞浆/胞核内出现棕黄色颗粒计为阳性细胞。判定方法：(1)按阳性细胞所占百分数评分：0分：0%,1分：<10%,2分：10%-50%,3分：>50%。(2)按细胞染色深浅评分：无棕黄色颗粒,与背景无区别为0分；有棕黄色颗粒,明显高于背景底色为1分；有染色较清晰的棕黄色颗粒,介于强弱之间为2分；有大量的深棕色颗粒,染色强为3分。综合染色强度和阳性细胞所占百分数进行判定,即(1)+(2)：最后得分≥4分为阳性表达(+),<4分为阴性表达(一)。2.3.2凋亡细胞的阳性结果判定及凋亡指数AI的计算用TUNEL法对凋亡细胞进行检测,所测得的凋亡细胞为细胞核染成棕黄色的细胞。凋亡指数AI的计算：在40×10高倍视野下随机选取10个视野观察,计算凋亡细胞与所计数细胞总数的比值,即AI=凋亡细胞数/细胞总数×100%。2.4统计学处理实验数据采用SPSS17.0统计软件进行分析。统计方法：卡方检验,卡方检验的连续性校正,配对资料的关联性分析及直线相关分析,以α=0.05为检验水准。3结果3.1 PDCD5在正常肺组织和NSCLC组织中的表达及其与临床病理特征的关系PDCD5主要表达于正常肺组织上皮细胞,NSCLC细胞胞浆也有表达,但染色强度明显弱于正常肺组织,阳性细胞数也明显少于正常肺组织,染色为浅黄色至棕黄色。60例NSCLC组织中PDCD5的阳性表达率为25.0%(15/60),20例正常肺组织的阳性表达率为70.0%(14/20),差异有统计学意义(χ2=13.144,P=0.000)。PDCD5在NSCLC高分化组中的阳性表达率为60.0%,中、低分化组的阳性表达率为18.0%,差异有统计学意义(χ2=5.760,P=0.016)。TNM分期ⅠⅡ]期的阳性表达率为38.9%,Ⅲ、Ⅳ期的阳性表达率为4.2%,差异有统计学意义(χ2=9.259,P=0.002)。PDCD5在有淋巴结转移的NSCLC患者中的阳性表达率为3.7%,无淋巴结转移者阳性表达率为42.4%,差异有统计学意义(χ2=11.874,P=0.001)。PDCD5的表达与NSCLC患者的年龄、性别、肿瘤直径、病理分型、是否吸烟及有无胸膜转移无关。3.2 Survivin在正常肺组织和NSCLC组织中的表达及其与临床病理特征的关系Survivin主要定位于胞浆或胞核。60例NSCLC组织中Survivin的阳性表达率为46.7%(28/60),20例正常肺组织的阳性表达率为10.0%(2/20),差异有统计学意义(x2=8.604,、P=0.003)。Survivin在NSCLC高分化组中的阳性表达率为10.0%,中、低分化组阳性表达率为54.0%,差异有统计学意义(χ3=4.835,P=0.028)。TNM分期Ⅰ、Ⅱ期的阳性表达率为33.3%,Ⅲ、Ⅳ期的阳性表达率为66.7%,差异有统计学意义(χ2=6.429,P=0.011)。Survivin在有淋巴结转移的NSCLC患者中的阳性表达率为74.1%,无淋巴结转移者阳性表达率为24.2%,差异有统计学意义(χ2=14.816, P=0.000)。Survivin的表达与NSCLC患者的年龄、性别、肿瘤直径、病理分型、是否吸烟及有无胸膜转移无关。3.3 NSCLC组织中PDCD5和Survivin表达的相关性配对资料的关联性分析得出,PDCD5和Survivin在NSCLC组织中的表达存在关联性,为负相关(χ2=8.929,P=0.003,r=-0.386)。3.4PDCD5、Survivin与细胞凋亡之间的关系直线相关分析得出,PDCD5积分与凋亡指数AI成正相关(r=0.663,P=0.000),Survivin积分与凋亡指数AI成负相关(r=-0.736,P=0.000)4结论1、PDCD5、Survivin基因的异常表达可能在NSCLC的发生、发展中起到一定作用。PDCD5、Survivin有望成为新的肿瘤标记物。2、PDCD5阳性表达率越低,NSCLC恶性程度可能越高；Survivin阳性表达率越高,NSCLC恶性程度可能越高。3、检测(?)PDCD5、Survivin可能有助于临床TNM分期。4、检测(?)PDCD5、Survivin可能有助于有无淋巴结转移的判断。