亲水性植物甾醇衍生物的制备及降脂功效研究

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植物甾醇是一种天然活性成分,具有降脂、抗癌、抗炎等多种生理功效。植物甾醇水不溶、油溶性差、熔点高、生物利用率低,极大限制其食品应用。为拓宽植物甾醇在含水体系中的应用,本研究以聚乙二醇(PEG)为亲水修饰剂,以离子液体为催化剂合成亲水性植物甾醇衍生物,改善植物甾醇水溶性;并在此基础上研究其降脂功效,并提出可能的降脂机理。首先,合成了中间产物-植物甾醇琥珀酸单酯(简称单酯,PSHS),并通过分离纯化得纯品,以单酯纯品为反应原料进一步合成了目标产物-植物甾醇聚乙二醇琥珀酸二酯(简称二酯,PPGS)。利用薄层色谱层析(TLC)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、质谱(MS)和核磁共振波谱(NMR)对产物进行结构表征,证实合成产物为单酯和二酯。二酯的水溶性较植物甾醇有显著提高。其次,对单酯和二酯的合成规律进行探究。通过单因素实验得出最佳工艺参数:(1)反应溶剂甲苯,催化剂[BSO3HMim][HSO4],催化剂用量为原料质量的4%(w/w),反应温度100℃,植物甾醇与琥珀酸酐摩尔比1:1.5,底物浓度75mmol/L,反应2 h,单酯转化率可达94.0%。(2)无溶剂法合成二酯-2000,反应温度110℃,催化剂[BSO3HMim][HSO4],催化剂用量为单酯质量的6%(w/w),单酯与PEG 2000摩尔比1:1.25,反应1 h后,二酯的质量转化率和摩尔转化率可高达97.2%和88.0%左右。除此之外,为了简化两步酯化法的分离纯化步骤,还尝试采用“一锅法”合成二酯,省去分离纯化步骤,直接加入PEG 2000和[BSO3HMim][HSO4],110℃反应14 h,二酯-2000的质量转化率和摩尔转化率可达为97.8%和90.3%。分别以PEG 600、PEG 1000和PEG 2000为亲水修饰剂制备了3种不同分子量的二酯(二酯-600、二酯-1000和二酯-2000)。以高脂饮食大鼠为动物模型,经口灌胃给样,考察三种二酯对血脂、肝脂、排泄物脂质水平的影响。结果表明,二酯对高脂饮食大鼠的体重有一定程度的抑制作用;三种二酯均可不同程度地降低血清总胆固醇(TC)水平,显著降低血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平、LDL-C/HDL-C值和肝脏胆固醇含量,一定程度上增加排泄物中胆汁酸含量,促进胆固醇排出体外。三种二酯还可增加肝脏LDLR、SREBP-2和CYP7A1mRNA水平,表明亲水性植物甾醇酯可通过影响肝脏中与胆固醇代谢相关受体、蛋白或酶的表达从而降低胆固醇水平。
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