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抗菌肽自十九世纪七八十年代发现以来,数量已达到2200多种,并有大批该类药物成功进入临床试验阶段,在实践中取得了令人瞩目的疗效。同时,将抗菌肽的基因通过转基因技术转入细胞,便可以得到抗病品种。该类合成的抗菌肽在奶牛乳房炎、仔猪腹泻以及猪瘟等细菌性疾病中取得了瞩目的成绩。与传统的抗生素相对比,抗菌肽不会产生耐药性且无残留无毒。到目前为止,全世界已有五十多个国家和地区批准Nisin可作为食品防腐剂。最近,中国也制订了Nisin产品的国家标准,并已在进行试验性使用,所以对Nisin的研究有着深远的意义,本项目以乳酸链球菌株T0538(从奶酪中分离获得)为实验材料,从中获得一种新的乳酸链球菌素,并探究了该乳酸链球菌素最小抑菌浓度、胰蛋白酶的酶抑制活性、溶血活性和出血活性以及杀菌机理,研究结果如下：1.获得了乳酸链球菌素NisinP,并确认为新发现的乳酸链球菌素。以乳酸链球菌株T0538(从奶酪中分离获得)为实验材料,通过SephadexG-25凝胶过滤层析、制备型反相高压液相层析、离子交换层析和分析型反相高效液相色谱层析,分离纯化出一种新乳酸链球菌素NisinP,并通过埃德曼降解法对乳酸链球菌素NisinP的一级结构进行了鉴定。网上搜库序列比对后,确定所分离获得的乳酸链球菌素NisinP与以往发现的Nisin在氨基酸序列上存在差异,属于新发现的乳酸链球菌素。2.获得了新乳酸链球菌素的主要生物学指标。对新乳酸链球菌素的最小抑菌浓度、胰蛋白酶的酶抑制活性、溶血活性和出血活性进行了检测,结果发现,NisinP对革兰氏阳性菌具有非常好的抑菌效果,但是对革兰氏阴性菌却没有表现出抑菌效果,除抗菌活性外,乳酸链球菌素NisinP还具有胰蛋白酶抑制活性,同时也表现出了极其微弱的溶血活性,但并没有检测到出血活性。3.探明了乳酸链球菌素Nisin P的杀菌机理。将S.aureus ATCC25923菌株与乳酸链球菌素NisinP共孵育后进行透射电镜观察,分析了新乳酸链球菌素NisinP对细菌形态及细菌表面结构的影响。结果显示,处理前S.aureus ATCC25923菌株具有完整的细胞壁和细胞膜,并且其细胞结构完整、表面光滑,能观察到完整的菌毛,细胞表面并未出现任何损伤。由于细菌内部还有蛋白质和DNA等物质,它们能够与染色液中所含有的重金属离子结合,从而使负染后的菌体呈现深黑色。经过乳酸链球菌素NisinP处理后,S.aureus ATCC25923细胞膜遭到破坏,出现不同程度的破损或出现小孔,细胞膜界限模糊不清,甚至细胞膜完全溶解。细胞膜的损伤导致细胞内容物外泄,菌体部分或完全破裂,并伴有细胞质稀释的现象,细胞质解体,形成空腔,细胞内容物的减少或消失,致使被染色的细胞颜色变浅。以上结果表明,乳酸链球菌素NisinP能够使S.aureus ATCC25923菌体细胞壁破裂或者在细胞表面形成孔洞,内容物外泄,最终导致菌体死亡。