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目的: 建立脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞氧化应激损伤的模型，探讨胍丁胺(AGM)干预后对氧化应激损伤的保护作用及机制研究。 方法: 1.常规培养RAW264.7细胞，使用不同浓度AGM(50000、10000、2000μM及400、80、16、3.2、0.64、0.128、0μM)作用RAW264.7细胞24h，MTT法筛选AGM最佳干预浓度。 2.将实验分为control组、LPS(10μg/ml)组、LPS+AGM(1mM)组、AGM组，应用DCFH-DA探针法检测RAW264.7细胞内ROS含量，经典的Griess reagent法检测RAW264.7细胞内NO含量，Western blot法检测RAW264.7细胞质内iNOS表达，化学比色法检测RAW264.7细胞内MDA的含量及SOD、CAT、GSH-Px酶的活性，Western blot检测LPS及AGM干预RAW264.7细胞24h及30h后细胞质及细胞核内Nrf2蛋白的表达量、RT-PCR检测LPS及AGM干预细胞30h及36h后，Nrf2下游抗氧化酶HO-1、NQO1、GCLc、GCLm mRNA及炎症因子IL-6 mRNA的表达。 结果: 1.MTT法检测胍丁胺无毒性浓度:以log(AGM)为横坐标，OD490为纵坐标，Prism6.0软件计算IC50=5.4mM，则1mM AGM对细胞无毒害作用，可作为后续实验药物浓度。 2.LPS诱导对RAW264.7细胞产生的氧化应激损伤的影响及AGM的保护作用:LPS(10μg/ml)与AGM(1mM)共同作用RAW264.7细胞24h(1) ROS及MDA control组与AGM单独组RAW264.7细胞内ROS、MDA的表达量无明显差异;与control组相比，LPS组细胞内ROS、MDA表达明显升高，差异具有统计学意义(P＜0.05);与LPS组相比，LPS+AGM组细胞内ROS、MDA表达水平明显降低，差异具有统计学意义(P＜0.05)。(2) NO及iNOS control组与AGM单独组细胞内NO水平及iNOS蛋白的表达量无明显差异，与control组相比较，LPS组细胞内NO水平及iNOS蛋白表达量增加，差异有统计学差异(P＜0.05);与LPS组相比，LPS+AGM组细胞内NO水平及iNOS蛋白表达量明显降低，差异有统计学意义(P＜0.05)。(3) SOD、CAT、GSH-Px control组与AGM单独组细胞内SOD、CAT、GSH-Px酶的活性无明显差异，与control组相比，LPS组细胞内SOD、CAT、GSH-Px酶的活性明显降低，差异有统计学意义(P＜0.05);与LPS组相比，LPS+AGM组细胞内SOD、CAT、GSH-Px酶活性明显升高，差异具有统计学意义(P＜0.05)。 3.AGM对LPS诱导的RAW264.7细胞氧化应激损伤的保护机制研究:(1)western blot结果表明，LPS刺激RAW264.7细胞24h后，细胞质内各组Nrf2蛋白表达无明显差异;细胞核内，LPS+AGM组较LPS组的Nrf2蛋白表达明显增加，AGM单独组较control组的Nrf2蛋白表达明显增加。LPS刺激RAW264.7细胞30h，结果与上述趋势一致。(2) RT-PCR结果表明，LPS刺激RAW264.7细胞30h后，LPS+AGM组较LPS组细胞内HO-1 mRNA明显增多，差异有统计学意义(P＜0.05)，AGM单独组较control组细胞内HO-1mRNA明显增多，差异有统计学意义(P＜0.05)。LPS刺激RAW264.7细胞36h，结果与上述趋势一致。对于Nrf2下游的其他抗氧化酶指标，与LPS组比较，LPS+AGM组细胞内NQO-1、GCLc、GCLm mRNA的表达无明显变化，差异无统计学意义(P＞0.05);与control组比较，AGM单独组RAW264.7细胞内NQO-1、GCLc、GCLm mRNA的表达无明显变化，差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论: 1.在LPS诱导的RAW264.7细胞氧化应激损伤中，AGM通过减少RAW264.7细胞内ROS及NO的产生，降低MDA的生成、iNOS蛋白的表达及增加抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px的活性从而起保护作用。 2.在LPS诱导RAW264.7细胞氧化应激损伤中，AGM可能通过促进核转录因子Nrf2的入核及增加其下游抗氧化酶HO-1mRNA的表达，从而起到保护作用。