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背景及目的：癫痫(Epilepsy, EP)是大脑神经元过度同步异常放电导致的神经系统功能异常综合征。癫痫持续状态(Status Epilepticus, SE)是癫痫连续发作之间意识未完全恢复又频繁再发,或发作持续30分钟以上不自行停止,可导致急性或持续性的认知及行为改变,是神经内科常见急症之一。蛋白激酶C(Protein kinase C, PKC)参与神经元的生长、分化和凋亡等生理病理过程。PKCδ是一种新型的PKC亚型的成员,在各种刺激因素的作用下,PKCδ可促使caspase3活化,引起细胞凋亡。钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)为丝/苏氨酸蛋白磷酸酶家族成员,我们既往研究结果表明,CaN可引起难治性癫痫,他克莫司(Tacrolimus, FK506)可通过特异性抑制CaN控制癫痫发生,逆转神经元损伤。已有研究发现,在脑缺血模型中,CaN活化后激活PKC,引起细胞内信号传导。在癫痫的病理生理过程中,关于PKC各亚型与CaN的相互作用,以及对于神经元损伤的影响,尚缺乏相关研究。本研究应用Wistar大鼠建立氯化锂-匹鲁卡品癫痫持续状态模型,观察海马形态学变化、PKCδ的表达及FK506对其的影响,探究CaN与依赖PKCδ的细胞凋亡途径之间的关系。方法：1.动物模型：将108只健康成年雄性大鼠随机分为对照组(Control组)、癫痫组(SE组)和FK506处理组(FK506组),每组36只。SE组与FK506组各分为6组,分别于SE后3、6、12、24、72h及7d处死取材,对照组大鼠不建立癫痫模型,于对应时间点处死。2.行为学观察：根据Racine分级观察大鼠癫痫发作行为变化,记录癫痫发作潜伏期及发作程度。3.脑组织病理学观察：HE染色观察SE后7d海马区神经元的损伤。4. RT-PCR法：检测SE后不同时点(3、6、12、24、72h)海马PKCδmRNA的表达。5.免疫组织化学SP法：检测SE后不同时点(3、6、12、24、72h)海马PKCδ蛋白的表达。结果：1.FK506抑制癫痫发作：SE组和FK506组大鼠在注射匹鲁卡品后均出现癫痫发作,开始发作程度较轻,逐渐加重,直至出现癫痫持续状态。两组发作潜伏期和发作程度不同。与SE组相比,FK506组大鼠潜伏期明显延长(P<0.01),发作级别降低(P<0.05)：Control组大鼠无痫性发作。2.FK506减轻SE后海马神经元损伤：在光镜下,SE后7dControl组大鼠海马CA3区神经元排列整齐,形态正常,无神经元缺失；SE组大鼠海马CA3区神经元排列紊乱,失去正常结构,与对照组相比神经元缺失严重(P<0.05)；FK506组大鼠海马CA3区神经元数目较对照组减少,但较SE组存活神经元明显增多(P<0.05)。3.FK506抑制PKC8的表达：Control组PKC8mRNA和蛋白仅有少量表达；与Control组相比,SE组各个时点PKC8表达均显著增多(P<0.05),SE后6h PKC8mRNA表达最高,PKC8蛋白的平均光密度值SE后12h达高峰(P<0.01),以后二者均逐渐降低,但72h仍高于对照组水平(P<0.05)；FK506组降低其表达,同时可减轻海马神经元损伤(P<0.05)。结论：FK506可能通过特异性抑制CaN间接调节依赖PKC8的细胞凋亡途径,减少SE后神经元损伤,发挥抗癫痫和脑保护作用,为临床应用免疫抑制剂治疗癫痫提供新的理论依据。