新疆两盐湖嗜盐菌生物多样性及嗜盐菌素分离纯化的研究

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本工作结合分子生态学方法和微生物分离培养方法对新疆巴里坤湖与玛纳斯湖进行嗜盐菌物种资源和酶学特性、多样性分析。从样品中分离得到51株嗜盐菌。经16S rRNA基因序列分析发现,中度嗜盐菌分别属于Planococcaceae,Bacillaceae, Staphylococcus,Halomonadaceae,Salicolaceae及Pseudomonadacaeae 6个属,极端嗜盐古菌属于Halobacteriaceae属。功能酶筛选表明产蛋白酶的嗜盐菌有15株,产酯酶的有23株,产淀粉酶的有8株,未获得产脂肪酶和纤维素酶的嗜盐菌。 嗜盐菌素(Halocin)是由极端嗜盐古菌分泌的一种能够抑制近属或近种微生物生长的蛋白类抗生素,是研究极端嗜盐古菌基因表达调控和蛋白分泌、结构和功能的理想材料。对23株极端嗜盐古菌进行产嗜盐菌素的筛选。抑菌实验表明21株嗜盐古菌可产生嗜盐菌素。选择理化性质较稳定的菌株AJ35发酵培养5d,将发酵液离心去菌体,上清经TCA沉淀,葡聚糖凝胶(Sephadex G-100)层析,琼脂糖凝胶(DEAE Sepharose Fast Flow)层析,嗜盐菌素AJ35的比活力提高了21.16倍,收得率为6.929%。经SDS-PAGE测定,菌株AJ35所产嗜盐菌素的分子量为29.1-20.1kd。
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