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目的: 观察电针对干眼症兔泪液分泌、泪膜稳定性及眼表损伤的干预作用,探讨电针对干眼症兔泪腺和结膜上皮细胞凋亡及凋亡相关蛋白Caspase-3、Fas、Bcl-2表达的影响,从细胞凋亡角度探讨电针治疗干眼症的作用机制。 方法: 雄性健康新西兰大白兔24只,随机将其分为正常组、模型组、电针组和假电针组,每组各分6只大白兔。采用0.1%苯扎氯铵滴眼制作兔干眼症模型;模型制备成功后,进行干预治疗。正常组和模型组均不进行任何治疗;电针组取穴攒竹、太阳、丝竹空和风池穴,其中攒竹穴和太阳穴接韩氏电针仪,采用连续波,频率2Hz,留针20min,1次/天,共治疗7d;假电针组,取穴同电针组,穴位进针透皮即止,不通电,留针20min,1次/天,共治疗7d。治疗结束后,观察泪液分泌量、泪膜破裂时间和角膜荧光素染色的情况;采用HE染色光镜下观察泪腺和结膜组织病理学变化;应用TUNEL法检测泪腺和结膜上皮细胞凋亡;采用免疫组化检测泪腺和结膜上皮细胞Caspase-3、Fas、Bcl-2的蛋白表达。 结果: 1、泪液分泌量:与正常组比较,模型组、假电针组的泪液分泌量明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.01);与模型组比较,电针组的泪液分泌量明显增多,差异有统计学意义(P<0.01)。与假电针组比较,电针组的泪液分泌量明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。 2、泪膜破裂时间:与正常组比较,模型组、假电针组泪膜破裂时间均明显缩短,差异均有统计学意义(均P<0.01);与模型组比较,电针组的泪膜破裂时间明显延长,差异有统计学意义(P<0.01);与假电针组比较,电针组泪膜破裂时间明显延长,差异有统计学意义(P<0.05)。 3、角膜荧光素染色:与正常组比较,模型组角膜荧光素染色明显增多,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,电针组角膜荧光素染色明显减少,差异有统计学意义(P<0.01);与假电针组比较,电针组角膜荧光素染色明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。 4、泪腺和结膜组织病理学观察:泪腺和结膜组织在HE染色后观察,结果显示与模型组比较,电针组干眼症兔的结膜和泪腺组织病理损伤均有一定程度的改善。 5、泪腺和结膜上皮细胞凋亡的检测:与正常组比较,模型组泪腺和结膜上皮细胞凋亡率均显著增加(均p<0.01);与模型组相比,电针组泪腺和结膜上皮细胞凋亡率均显著下降(均p<0.01)。 6、泪腺和结膜上皮细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Fas、Bcl-2的表达:与正常组比较,模型组泪腺和结膜上皮细胞Fas、Caspase-3阳性表达积分光密度都显著增加(均p<0.01),Bcl-2阳性表达积分光密度显著降低(p<0.01);与模型组比较,电针组泪腺和结膜上皮细胞Fas、Caspase-3阳性表达积分光密度都显著下降(均p<0.01),Bcl-2阳性表达积分光密度显著增加(p<0.01)。 结论: 1、电针能提高实验性干眼症兔泪液分泌量,增加泪膜破裂时间,促进兔泪腺和结膜组织损伤的修复。 2、电针能抑制实验性干眼症兔泪腺和结膜上皮细胞的凋亡。 3、电针能下调实验性干眼症兔泪腺和结膜上皮细胞Caspase-3、Fas蛋白的表达,上调Bcl-2蛋白的表达,该作用可能是其抑制泪腺和结膜上皮细胞凋亡、进而改善干眼症的重要机制。