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目的：通过制备大鼠在体心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusionI/R)损伤模型,观察再灌注心肌损伤程度及凋亡情况,探讨心肌缺血与缺血再灌注损伤异同及凋亡在心肌缺血再灌注损伤中的作用。
方法：建立在体大鼠心肌I/R损伤模型,将75只大鼠随机分为3组,假手术组:开胸穿线不结扎组；I/R组:结扎球囊扩张导管压迫30min再灌注120min、梗死组:结扎球囊扩张导管压迫150min。术后存活30只,每组10只,各组分别取心肌组织行HE染色观察心肌损伤程度,用原位末端标记法(TUNEL)染色计算凋亡指数(AI=凋亡细胞/总细胞数％)及通过caspase-3活性检测细胞凋亡。
结果:1.各组大鼠心肌组织形态学观察(HE染色光镜):假手术组:心肌细胞排列整齐,染色均匀,心肌组织未见出血或炎性反应；缺血再灌注组(I/R):心肌染色不均匀,可见炎性细胞浸润,心肌纤维萎缩,呈灶性溶解坏死及心肌纤维空泡样变性；梗死组:心肌出血,心肌纤维断裂,心肌大片溶解坏死。2.各组大鼠TUNEL染色凋亡细胞比较:假手术组:凋亡细胞个数为9.20±2.97,凋亡指数(％)为0.92±0.30；缺血再灌注组(I/R):凋亡细胞个数为128.30±17.86,凋亡指数(％)为12.83±1.79；梗死组:凋亡细胞个数为60.10±13.00,凋亡指数(％)为6.01±1.30。缺血再灌注组(I/R)凋亡细胞个数及凋亡指数明显高于假手术组及梗死组(P<0.01),梗死组凋亡细胞个数及凋亡指数明显高于假手术组(P<0.01)。3.各组大鼠Caspase-3活性比较:假手术组OD450nm值为0.36±0.02；缺血再灌注组OD450nm值为0.81±0.05；梗死组OD450nm值为0.54±0.03。缺血再灌注组Caspase-3活性明显高于假手术组及梗死组(P<0.01),梗死组Caspase-3活性明显高于假手术组(P<0.01)。
结论：通过结扎球囊扩张导管压迫大鼠冠状动脉前降支,缺血30分钟/再灌注120分钟后,可明显造成心肌损伤,可以此模拟心肌缺血再灌注损伤,与梗死组比较,I/R组的casepase-3活性增强,凋亡指数增加,表明缺血和缺血/再灌注心肌均可发生细胞凋亡,再灌注早期心肌细胞的死亡以凋亡为主。