中药外敷膏剂对AGA大鼠模型的抗炎作用及对TLRs-MyD88通路的影响

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目的:采用MSU结晶关节腔内注射法建立AGA大鼠模型,探讨中药外敷膏剂对TLRs-MyD88信号通路及IL-1β、TNF-α炎症因子的影响,从病理组织、细胞及分子水平,多角度探讨中药外敷膏剂对AGA炎症反应的抑制作用,从而部分阐明中药外敷膏剂改善症状的作用,为临床治疗AGA提供科学依据。方法:1.将40只雄性SD大鼠随机分为正常组(A)、模型组(B)、秋水仙碱组(C)、中药外敷膏剂组(D)、扶他林软膏组(E)5组,每组8只。试喂养1周后进行实验。中药外敷膏剂组及扶他林软膏组均以膏剂外敷,2次/天,秋水仙碱组0.3mg/kg/d,其余组别均以生理盐水灌胃,疗程5天。第三天灌胃前,采用尿酸钠结晶关节腔注射进行造模,除空白组外,其余组别均进行造模,空白组关节腔注射生理盐水。2.大鼠于末次灌胃1小时后,麻醉处死,进行取材。用ELISA法测定血清IL-1β、TNF-α的表达。测定TLR2、TLR4、MyD88的蛋白表达水平,选用免疫组织化学法的方法;观察大鼠踝关节滑膜组织的病理改变,选用HE染色的方法。结果:1.观察经MSU结晶所致急性痛风性关节炎SD大鼠踝关节造模后4h,24h,48h,72h肿胀程度,经统计学分析(P<0.05)具有统计学差异,说明中药外敷膏剂对MSU结晶所致急性痛风性关节炎SD大鼠踝关节肿胀起到一定的抑制作用。2.中药外敷膏剂对AGA大鼠踝关节滑膜组织中的TLRs/MyD88通路上游蛋白TLR2、TLR4、MyD88有抑制作用。3.中药外敷膏剂对急性痛风性关节炎大鼠血清中的IL-1β、TNF-α起到一定的抑制作用。结论:中药外敷膏剂治疗急性痛风性关节炎有确切疗效,其治疗机制可能与抑制TLRs-MyD88通路上游蛋白TLR2、TLR4、MyD88及下游炎症IL-1β、TNF-α表达有关。
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