理气消瘿片对实验性大鼠甲状腺肿的作用及机制的研究

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目的:观察理气消瘿片的安全性以及研究理气消瘿片对丙基硫氧嘧啶所致大鼠甲状腺肿的作用及其机理。  方法:  1、理气消瘿片急性毒性试验  取健康小鼠80只(体重18~22 g,SPF级),雌雄各半,动物按体重、性别随机分为4组。根据预试验结果,确定各组动物均进行灌胃给药2次,给药间隔为6h,日给药剂量为12.5 g·kg-1、15.6 g·kg-1、19.5 g·kg-1、24.4g·kg-1,给药容量为0.2 mL/10g,末次给药4h后喂食,给药期间不禁水。给药后观察2W,自由饮水和进食,记录各组动物服药后的症状、体征及其死亡数目和死亡时间。  2、理气消瘿片对大鼠甲状腺肿的作用及其机制研究  健康白色封闭群大鼠(SD)大鼠(雄性:120-150 g;雌性:100-120g;SPF级)共96只,雌雄各半,随机分为6组:即正常组、模型组、优甲乐组、理气消瘿片(低、中、高剂量)组。大鼠适应性饲养一周后,正常组大鼠每天灌胃给予生理盐水2 mL·kg-1,其余各组大鼠每天灌胃给予丙基硫氧嘧啶20 mg·kg-1。理气消瘿片低、中、高剂量组同时分别灌服2.4g·kg-1、4.8 g·kg-1、9.6 g·kg-1理气消瘿片的水溶液,优甲乐组大鼠同时灌以7.8 ug·kg-1的优甲乐,连续60 d。末次给药前一天禁食不禁水。末次给药后1h颈总动脉取血,留取血清备检;取血后迅速钝性剥离甲状腺和垂体组织,滤纸吸干水分,精密称重,计算脏器指数(脏器指数=脏器质量/体质量),用4%多聚甲醛溶液固定,进行HE染色切片,在光学显微镜下观察其形态结构,并用免疫荧光测定各组甲状腺中的bFGF、TGF-β、Bcl-2蛋白的表达。  结果:  1、小鼠灌胃理气消瘿片LD50为15.58 g·kg-1(约相当于成人临床日用量的606倍),95%可信限为14.61~16.62 g·kg-1。小鼠死后解剖肉眼观察重要器官,心脏,肝,脾,肺,肾,脑等,未见明显异常。  2、理气消瘿片对大鼠甲状腺肿的作用及机制的研究  (1)优甲乐、理气消瘿片(低、中、高剂量)有不同程度地改善甲状腺肿大,体重等体征症状的作用。  (2)理气消瘿片对大鼠甲状腺指数的影响:模型组大鼠甲状腺指数与正常组比较P<0.05,具有统计学意义,说明用丙基硫氧嘧啶后大鼠甲状腺肿大,造模成功;理气消瘿片(低、中、高剂量)组大鼠甲状腺指数与模型组比较P<0.05,说明其有减轻甲状腺肿大的作用。  (3)理气消瘿片对大鼠垂体指数的影响:经统计学处理,与正常组的大鼠垂体指数比较无显著性差异。  (4)血清学检测结果显示:FT3水平降低,理气消瘿片(低、中、高剂量)组,模型组,优甲乐组与正常组比较P<0.05;模型组与正常组比,P<0.05,表明该模型是抑制FT4组产生的,理气消瘿片(低、中、高剂量)与模型组比未见显著差异;与正常组比,TSH含量均增加,理气消瘿片(低、中、高剂量)组与模型组比较无统计学差异。  (5)病理检查:理气消瘿片(低、中、高剂量组)和优甲乐组对甲状腺组织细胞的结构有一定的保护作用,并能促进甲状腺细胞的恢复。  (6)免疫荧光结果显示:  bFGF、Bcl-2、TGF-β蛋白的阳性产物定位在细胞的胞浆、胞膜,与正常组比,各组甲状腺组织中bFGF、Bcl-2蛋白阳性表达明显较高(P<0.05),TGF-β蛋白阳性表达较低(P<0.05);与模型组比,理气消瘿片(低、中、高剂量)组的bFGF、Bcl-2蛋白阳性表达较低(P<0.05),TGF-β蛋白阳性表达较高(P<0.05)。  结论:  1、理气消瘿片较为安全,可供临床试用。  2、理气消瘿片能降低大鼠甲状腺肿的甲状腺指数,并能改善甲状腺组织的结构;对大鼠垂体指数无明显影响;对大鼠血清中FT3,FT4,TSH水平影响不明显;其减轻丙基硫氧嘧啶所致大鼠甲状腺肿大的作用机制与降低甲状腺组织中bFGF,Bcl-2蛋白的表达,增强TGF-β蛋白的表达有关。
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