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急性肝衰竭是肝损害突然加重的临床表现。已经报道了有多种因素可能在这一过程中发挥作用。然而，直到现在其发病机制尚不清楚。 本实验室前期从一个急性肝衰竭病人获得了HBV准种的两个全长基因组克隆株SH和SH-DPS(B基因型，adw2血清型)，之前的研究表明SH和SH-DPS在共转染的情况下，HBV的DNA复制水平得到明显增强，提示两个克隆的共存可能在HBV感染及致病过程中发挥重要作用。本研究对两个克隆株的体内外表型特征及诱导机体免疫反应情况进行进一步分析，以揭示HBV准种的致病机理。 论文第一章首先简要概述乙肝病毒的分子生物学特征，复制生活周期及流行病学特点;其次描述了HBV各基因区的常见突变及其与病毒感染致病的关系，并围绕一些关键突变位点在病毒致病机制中所起的作用介绍了最新的国内外研究进展，还对用于研究HBV的实验室细胞模型和小鼠模型等进行了综述;最后引出本研究的目的和意义。 论文第二章首先分析了SH和SH-DPS的序列信息，发现SH和SH-DPS包含preC/C和核心启动子的经典突变。此外，SH-DPS的preS1/preS2区域还包含两段缺失突变。基于测序的克隆数目，SH对SH-DPS的比值为1∶4。通过ELISA、Western blot，免疫荧光进一步分析了两个克隆在单独或共存情况下病毒蛋白表达、分泌、定位及病毒的复制能力。结果显示SH-DPS的HBsAg有分泌缺陷，并且在细胞内有异常聚集;尽管SH与SH-DPS的复制能力较弱，但是当两者以1∶4共存时增强病毒的复制，同时改变了HBcAg的定位。 论文第三章进一步通过高压尾静脉注射小鼠模型分析了两个克隆在体内诱导免疫反应的情况。在注射后第1天即检测到SH的病毒血症，并维持到注射后第21天，而整个检测的时间段中都没有检测到SH-DPS的HBsAg，这与体外结果一致，表明其分泌能力被破坏。同时检测了病毒的复制和病毒粒子的分泌，与体外结果相比，SH、SH-DPS及共注射组的复制能力都远远低于野生型。相对应的是，SH分泌到血清中的病毒粒子也相应的减少了;免疫组织化学的方法分析蛋白表明，病毒蛋白定位和表达与体外结果基本一致，最后检测了两个克隆引起的体液免疫应答和细胞免疫应答水平，发现SH与SH-DPS以1∶4共存时，诱导了增强的体液免疫反应和细胞免疫应答。 第四章对研究结果进行了总结。研究结果表明不同毒株的共存可能通过调节宿主免疫反应程度来促进免疫介导的肝损伤，对于了解HBV准种间的相互作用及HBV感染相关肝病重症化的分子机制具有参考意义。