若干蛋白质/酶的蛋白膜伏安法研究

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第一章:PEI膜中葡萄糖氧化酶的电子传递与酶活性调控 作者采用层层吸附技术,把葡萄糖氧化酶(GOD)分子包埋于聚乙烯亚胺(PEI)内。GOD的电子传递能力大大提高,同时,其酶活性得到了有效调控。基于双层PEI/GOD修饰电极,我们构建了一种新型无媒介体型葡萄糖检测装置,用于葡萄糖测定的线性响应范围为0.5mM-8.9mM,检测限为50μM,灵敏度0.76μAmM-1。 第二章:硫化镉纳米粒子膜内葡萄糖氧化酶的电化学行为利用纳米颗粒硫化镉(CdS)作为GOD的固定材料,考察了GOD与热解石墨电极之间的直接电子传递过程,发现酶的电子传递能力大大提高。同时,吸附态葡萄糖氧化酶能保持其生物活性和天然结构,其还原态能被溶解氧氧化,从而发生一个电催化反应,而且这个电催化反应由于葡萄糖的加入而受到遏制,使该反应的还原电流减少,从而可用于葡萄糖的测定。底物线性响应范围为0.5mM-11.1mM,检测限为50μM,灵敏度0.65μAmM-1。该方法能有效地排除常见共存物质抗坏血酸和醋氨酚的干扰。 第三章:磷脂膜内肌红蛋白与配体的结合磷脂膜固定的肌红蛋白在电极表面有良好的直接电化学响应,与配体咪唑结合后,表观标准电极电势出现负移,并与配体浓度相关。同时,研究发现膜带电情况对蛋白与配体的结合有很大影响。该工作为研究蛋白与配体的分子识别作用提供了一种简便、灵敏的新方法。 第四章:钙离子对辣根过氧化物酶的作用硅藻土-DMSO膜有利于辣根过氧化物酶(HRP)在电极表面的直接电子传递。据此,我们探讨了钙离子对HRP电子传递及催化活性的影响。研究表明,虽然钙离子对HRP的表观标准电极电势没有影响,但能减小其氧化还原峰间距,使反应的可逆性增加,说明蛋白的电子传递能力得到提高。同时,钙离子的存在使HRP的催化活性略有上升。
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