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目的:子宫内膜癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤,其发病率在世界范围内呈持续的上升趋势。尽管通过手术和放、化疗能使早期子宫内膜癌患者的生存率有明显提高,但晚期子宫内膜癌难以治愈的现实迫使人们探索新的治疗手段。随着对肿瘤发病机制研究的不断深入,人们已经认识到:肿瘤的侵袭和转移与新生血管形成密切相关。抗血管新生治疗即针对血管形成的某些因子及其关键步骤进行干预,从而阻断肿瘤内皮细胞血供,使其进入休眠状态并诱导凋亡,有效阻止肿瘤生长和转移,达到治疗肿瘤的目的。目前抗血管生成治疗已成为肿瘤治疗的热点。沙立度胺(Thalidomide,Thd)又名反应停,是一种生物合成血管生成抑制剂,具有抑制血管内皮生长因子(VEGF)活性和诱导细胞凋亡的作用。其已被用于多种实体瘤的Ⅰ、Ⅱ期临床治疗研究,但其对肿瘤血管生成抑制效应及抗瘤效果很不一致,可能存在种属和器官特异性。本实验从基础实验角度探讨其在子宫内膜癌治疗中是否具有可行性,从而为子宫内膜癌的治疗提供一种新的有效的靶向治疗药物。材料和方法:人子宫内膜癌细胞株ishikawa用RPMI-1640培养液(含10%胎牛血清),在37℃、饱和湿度、5%CO2的条件下培养,细胞贴壁培养,实验所用细胞保持在对数生长。不同浓度的沙立度胺作用于ishikawa细胞,利用MTT法检测细胞的生存抑制率;ELISA法检测VEGF含量;流式细胞仪分析细胞凋亡率和细胞周期。Giemsa染色后,倒置相差显微镜从形态上观察细胞凋亡。所有实验数据用SPSS 13.0版软件包做统计学处理,均以P<0.05为有统计学差异,P<0.01为有显著性差异。结果:1 MTT:不同浓度沙立度胺对子宫内膜癌细胞株作用24小时、48小时、72小时后,细胞增殖受到一定抑制,且呈时间和浓度依赖性。溶解沙立度胺所用的最高浓度的二甲基亚枫(DMSO)对细胞的增殖无影响(P>0.05)。沙立度胺作用24小时后,25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml浓度组的抑制率分别为11.90%、17.14%、28.90%、39.24%、51.00%;作用48小时后,抑制率分别为16.64%、27.1%、39.69%、49.64%、58.18%;作用72小时后,抑制率分别为26.48%、35.92%、45.63%、56.76%、62.82%。2沙立度胺对ishikawa细胞系VEGF分泌量的影响:根据人VEGF-ELISA试剂盒说明配制标准品及绘制标准曲线,得出不同浓度沙立度胺及作用不同时间的ishikawa细胞系VEGF分泌量(pg/ml)结果示:在24h、48h、72h三个时间点中,各个浓度(25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml)组间及与对照组间均有显著性差异(P<0.01),分别为356.7±2.5、299.3±2.4、242.8±1.6、180.3±2.0、135.7±2.2、411.5±3.1;320.4±1.6、271.7±3.1、207.7±2.5、153.4±2.9、107.4±2.1、418.5±2.7;307.5±1.4、250.7±1.0、192.3±2.5、129.1±1.6、92.1±2.0、416.1±2.4。对照组在三个时间点间无统计学差异(P>0.05),而各个浓度组在三个时间点间均具有显著性差异(P<0.01)。3沙立度胺作用于细胞后的形态学变化:对照组细胞形态饱满,细胞核染色均匀呈圆形或椭圆形,核仁清晰可见;沙立度胺作用48小时后,出现细胞质浓缩,变圆,细胞核浓缩、核碎裂等细胞凋亡特征性形态学改变,但未见大量凋亡小体,随着作用浓度的增加活细胞越少,并且上述现象越明显。4沙立度胺对细胞凋亡率和细胞周期的影响:不同浓度(50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml)组作用48小时后,Ishikawa细胞的凋亡率分别为(7.96±0.29)%、(12.14±0.77)%、(19.06±0.39)%,而空白对照组的凋亡率为(2.59±0.47)%,四组间相比较均有显著性差异(P<0.01);G0-G1期细胞百分率分别为(44.75±1.54)%、(46.45±0.81)%、(52.45±1.84)%、(40.38±1.54)%,不同浓度沙立度胺组与空白对照组间均有显著性差异(P<0.01),而50μg/ml组与100μg/ml组间无差别(P>0.05); S期的分别为(41.40±1.34)%、(26.55±1.21)%、(19.75±1.05)%、(51.80±1.81)%,四组间相比较均有显著性差别(P<0.01); G2-M期分别为(13.85±0.68)%、(27.00±1.53)%、(27.85±1.99)%、(7.81±0.52)%,不同浓度沙立度胺组与空白对照组间均有显著性差异(P<0.01),而100μg/ml组与200μg/ml组间无差别(P>0.05);细胞增殖指数分别为:(55.25±0.71)%、(53.55±0.81)%、(47.55±1.84)%、(59.61±1.55)%,不同浓度沙立度胺组与空白对照组间均有显著性差异(P<0.01),而50μg/ml组与100μg/ml组间无差别(P>0.05)。结论:1人子宫内膜癌细胞株ishikawa在体外能够分泌VEGF,并且沙立度胺对ishikawa细胞增殖和分泌VEGF的水平均有明显的抑制作用,呈时间浓度依赖性。这将为沙度胺的体内实验及临床运用提供理论依据。2沙立度胺可以通过诱导人子宫内膜癌ishikawa细胞凋亡和G1期生长阻滞而发挥直接的抗肿瘤效应。3沙立度胺能够明显降低S期%,并且呈浓度依赖性。这又为子宫内膜癌的临床治疗提供一个实验依据。