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本研究建立了猪肉中的红霉素、泰乐菌素、替米考星、吉他霉素、罗红霉素和交沙霉素等六种大环内酯类抗生素及阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素等三种阿维菌素类药物的高效液相色谱-电喷雾串联质谱多残留检测方法。
大环内酯类抗生素的猪肉样品用乙腈提取,经正己烷脱脂,C18固相萃取柱净化,4%氨甲醇洗脱,氮气吹干,50%乙腈溶解后上机检测。以乙腈和0.2%甲酸溶液作为流动相,梯度洗脱。阿维菌素类药物的猪肉样品采用乙腈提取后,直接过C18柱净化,乙腈洗脱,氮气吹干。以乙腈和0.1%甲酸溶液作为流动相,等度洗脱。采用多反应监测模式进行定性和定量分析。
六种大环内酯类抗生素在10~1000μg/L范围内,峰面积与浓度呈现良好的线性,相关系数均大于0.99。在猪肉中添加50μg/kg、100μg/kg、200μg/kg三个浓度水平,各种药物的回收率、批内变异系数及批间变异系数分别为:替米考星64.5%~83.1%、2.1%~14.4%、9.1%~13.9%,红霉素66.4%~77.6%、2.4%~10.5%、7.4%~12.1%,泰乐菌素61.3%~68.3%、3.2%~11.9%、9.7%~13.9%,吉他霉素56.2%~70.0%、2.7%~9.2%、8.9%~13.1%,罗红霉素74.6%~84.6%、3.9%~12.1%、6.3%~12.0%,交沙霉素67.5%~74.4%、2.6%~11.3%、8.9%~12.8%。
三种阿维菌素类药物在5~250μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99。在猪肉中添加5μg/kg、10μg/kg、20μg/kg三个浓度水平,各种药物的回收率、批内变异系数及批间变异系数分别为:阿维菌素64.0%~102.8%、3.5%~14.6%、7.1%~17.2%,多拉菌素80.9%~102.6%、2.7%~6.3%、5.3%~9.2%,伊维菌素75.5%~99.6%、1.4%~7.7%、8.1%~10.4%。
替米考星和吉他霉素在猪肉中的检测限为0.1μg/kg,定量限为0.5μg/kg,红霉素、泰乐菌素、罗红霉素和交沙霉素的检测限为0.05μg/kg,定量限为0.2μg/kg。阿维菌素类药物的检测限为0.5μg/kg,定量限为1μg/kg。
实验结果表明,本研究建立的方法灵敏、可靠,前处理过程简单易行,检测限低,准确度和精密度都满足残留检测要求。