水产品中甲苯咪唑残留量测定方法的研究

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甲苯咪唑既是一种人用药,也是一种兽用药,具有广谱的杀虫性质,对哺乳动物低毒,适合作为控制动物及鱼体消化道寄生虫病的药物。在水产养殖的过程中常会用来杀死水产当中的环虫类。目前检测甲苯咪唑的方法主要有:滴定法、紫外分光光度法、比色法、磷光分光光度法、荧光分光光度法、红外分光光度法、薄层色谱法、高效液相色谱法等,但这些方法多是测定甲苯咪唑片剂中甲苯咪唑的含量或是测定血液中的甲苯咪唑的量,针对水产品中的甲苯咪唑残留的测定不多,并且这些测定方法的检测限都比较高,难以满足日本肯定列表中规定的20μg/kg的标准。本文运用高效液相色谱仪作为检测手段对水产品中甲苯咪唑残留的分析方法做了比较系统的研究,根据高效液相色谱法的特点,以及甲苯咪唑的性质,选择了最佳的分析条件。本文选取了对分析检测效果影响较大的色谱柱、流动相、流动相配比、最大的吸收波长以及柱温等条件作为变量因子,考察HPLC法分析甲苯咪唑的色谱条件。通过对方法的精密度、检测限、样品稳定性以及加标回收实验,对本方法的方法学进行了考察。通过实验,得到最优的色谱条件:色谱柱:采用反相Mightysil RP18柱色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:0.3%磷酸溶液-乙腈混合溶液(65+35,0.3%磷酸溶液用三乙胺调pH值2.5),流速:1.0ml/min,检测波长:247nm,柱温:35℃。结果表明甲苯咪唑质量浓度在0.1μg/mL~2.4μg/mL范围内具有良好线性关系(r=0.9988)。所确定方法的检测限为10μg/kg,低于日本肯定列表中所规定的20μg/kg的标准。利用确定的方法对常见的水产品进行回收率试验,回收率为86.42%~96.82,平均相对标准偏差为1.58%。本文还探讨了HPLC方法中影响测量不确定度的因素并对其进行分析和评定,更加完整地对测量结果的质量有一个定量的描述,并使得测定结果有较好的溯源性,以便使新建立的分析方法更加系统和可靠。通过对测量结果进行不确定度分析,发现其中对测量结果影响最大的是标准曲线的制作。利用所确定的实验条件,并根据实际需要,制定了测定水产品中甲苯咪唑残留的福建省地方标准,目前本标准已经在福建省内正式发布、执行。本课题完成的利用高效液相色谱法对甲苯咪唑残留分析方法研究,方法操作简便、灵敏、可靠、具有切合实际的参考价值,适用于水产中甲苯咪唑残留的分析测定。
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