论文部分内容阅读
目的探讨局部应用神经生长因子((Nerve growth factor,NGF)联合胰岛素对糖尿病大鼠烫伤创面血管中凋亡相关因子bcl-2, bax表达的影响及创面愈合的机制。方法清洁级雄性Wistar大鼠,体重200-220g,采用两步给药法腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin, STZ), STZ剂量分别为第1天10 mg/kg,第3天50 mg/kg,建立糖尿病模型60只；模型制备后1个月,随机分为糖尿病对照组(B组)、胰岛素治疗组(C组)、NGF治疗组(D组)、NGF联合胰岛素治疗组(E组),设立正常烫伤对照组(A),每组15只。采用水蒸气烫伤法于各组大鼠背部制备2个深Ⅱ度烫伤创面。烫伤模型制备后,A、B组创面外敷3层生理盐水纱布,2次/日；C组创面外敷3层浸润5U胰岛素诺和灵30R的纱布,2次/日,并每日腹部皮下注射诺和灵30R4～6 U/kg；D组创面外敷3层浸润5mL NGF溶液(25 U/mL)的纱布,2次/日；E组创面外敷3层浸润5 mL NGF溶液(25 U/mL)及5U胰岛素诺和灵30R的纱布,2次/日,并于每日腹部皮下注射诺和灵30R 4～6U/kg。观察伤后7、11、15、21各组创面愈合情况并计算创面愈合率,伤后3、7、11、15、21天取创面组织行组织学及免疫组织化学染色观察,检测创面bcl-2, bax, CD34的表达并计算微血管密度。结果随时间延长,各组创面逐渐缩小,其中E组创面愈合速度、皮肤角化、毛发生长及肉芽组织和胶原纤维生长均优于其余各组。与A、B、C、D组相比,E组创面愈合率自第7天起显著增加,为[(25.33±2.32)%,(P<0.05)]；C、D组创面愈合率较B组显著增加,分别为[(16.68±1.95)%,(18.29±1.70)%,(P<0.05)]；D组自第15天起较A组显著增加,为[(54.84±3.60)%,(P<0.05)]。伤后随时间延长,各组CD34、bcl-2表达逐渐增强,至15天达高峰,21天表达减弱；E组各时间点表达均强于其他各组(P<0.05)。伤后3天各组均未见bax表达,7天后开始见新生血管内皮细胞bax表达,且随时间延长表达逐渐增强,其中E组表达强度均低于其余各组(P<0.05)。结论局部联合应用NGF和胰岛素可通过抑制糖尿病大鼠创面血管内皮细胞凋亡、增加创面血管生成,促进创面愈合