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目的:了解宫颈病变组织内 HPV L1蛋白表达的情况,寻找 HPV L1蛋白在不同病变组织内的表达规律,有无作为肿瘤治疗的靶侯选物的可能。同时研究 HPV L1 C-末端共同序列多肽抗体对组织内 HPV L1蛋白的检测能力,能否今后疫苗研制及肿瘤治疗的靶向抗体提供理论及实验上的支持。 方法:1)采用巢氏 PCR技术对所有宫颈病变的石蜡标本进行 HPV感染检测,确定 HPV感染检出率;2)采用HPV基因杂交分型技术对 HPV DNA阳性的标本,进行分型检测,确定 HPV感染的型别;3)采用本课题组制备的HPVL1多肽抗体做为一抗,对所有标本进行免疫组织化学检测,确定 HPV L1蛋白表达情况;同时采用市面上已成熟的HPV L1蛋白抗体做为一抗对所有标本进行免疫组织化学检测,确定 HPVL1蛋白表达情况;4)采用统计学软件进行分析,从而得出结论。 结果:1)用HPV L1通用型引物 MY09/11对70例标本所提取 DNA进行 PCR扩增,检出30例 HPV DNA阳性标本,HPV检出率为42.86％;用HPV L1通用型引物 GP5+/6+对 MY09/11扩增结果为阴性的所有标本进行 PCR扩增,检出11例 HPV DNA阳性标本, HPV检出率为27.50％;巢氏 PCR共检测到41例 HPV DNA阳性标本,HPV感染总检出率为58.57％。2)HPV型别总检出率87.80％(36/41)。其中单一感染有26例,占72.22％;混合感染有10例,占27.78％。混合感染中,7例为二重感染,3例为三重感染。按检出频数由多到少的顺序,依次为 HPV16、58、6、11、31、33、39、45、59和68。HPV16和58检出率较高,HPV16检出率最高为55.10％。3)采用本课题组自己制备的HPV L1多肽抗体的免疫组织化学方法检出43例为阳性反应,总检出率为61.43％;采用HPV L1蛋白抗体的免疫组织化学方法检出48例为阳性反应,总检出率为68.57％。发现不同宫颈病变的组织内均有 HPV L1蛋白表达,只是表达率有所不同,检测癌变组织 L1表达,其目的是确定 HPV L1蛋白有作为肿瘤治疗的靶侯选物的价值。4)用两种不同抗体的免疫组织化学检测结果做配对四格表 X2检验,得到 P=0.472>0.005,差异无统计学意义,两种抗体对 HPV L1蛋白的检出结果无明显差别,可认为相同,并且对 HPV L1蛋白检测具有同样高的检出率。 结论:1)宜昌市第一人民医院就诊妇女宫颈病变中HPV检出率为58.57％,其中HPV16及HPV58检出率较高,且以 HPV16型最高(为55.10％)。2)在宫颈癌中,HPV L1蛋白有表达,其有作为肿瘤治疗的靶侯选物的价值。3)本课题组的HPVL1多肽抗体制备成功,并且与已商品化的HPV L1蛋白抗体对 HPV L1蛋白的检出具有一致性。 HPV L1多肽抗体对 HPV感染具有广谱反应能力和明显的多价性,对已鉴定出的7种型别(HPV16、58、6、11、31、33和39)和未知型别都具有良好的检测能力,可为今后疫苗研制及肿瘤治疗的靶向抗体提供理论及实验上的支持。