【摘 要】
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牛肠道病毒（Bovine Enteroviruses,BEV）可引起牛患消化系统疾病及呼吸系统疾病,甚至还会影响牛的生殖功能。20世纪60年代末首次报道后,该病在全世界各国范围内流行,给各个国家养牛业带来了巨大的冲击,由此造成的经济损失更是难以估量。目前,世界各国都在积极研究该病的检测及防治办法。本试验采样于内蒙古某养殖场内患有消化系统、呼吸系统疾病的牛鼻拭子、粪拭子,接种于MDBK细胞,经PCR
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牛肠道病毒（Bovine Enteroviruses,BEV）可引起牛患消化系统疾病及呼吸系统疾病,甚至还会影响牛的生殖功能。20世纪60年代末首次报道后,该病在全世界各国范围内流行,给各个国家养牛业带来了巨大的冲击,由此造成的经济损失更是难以估量。目前,世界各国都在积极研究该病的检测及防治办法。本试验采样于内蒙古某养殖场内患有消化系统、呼吸系统疾病的牛鼻拭子、粪拭子,接种于MDBK细胞,经PCR检测,蚀斑克隆纯化,成功分离到3株BEV。并通过序列测定构建进化树,最终确定出分离毒株的型。2株属于E型,1株属于F型。本次采样均来自同一牧场,表明同一养殖场可能存在BEV-E、BEV-F型肠道病毒同时感染。本次试验结果为今后养殖场内对于BEV的免疫预防提供了重要依据。本试验用分离到的BEV毒株,通过对不同小鼠品系以及对不同感染途径的探索,最终建立了以灌胃为攻毒方式的ICR小鼠感染模型,感染小鼠出现不同的临床症状。对试验小鼠进行剖解,可见肝、小肠、肺、脾表现出不同病理变化。对这些组织进行PCR检测,可以检测出BEV特异性条带,成功建立了BEV动物感染模型,对以后BEV的动物模型建立提供了大量依据。本试验以分离到的BEV-E、BEV-F型毒株,制备了病毒含量为1×108.3TCID50/m L二价灭活疫苗,并对ICR小鼠进行了免疫试验,免疫剂量为200μL/只。通过牛肠道病毒二价灭活疫苗免疫后,针对E型毒株的中和抗体效价达到1:26.6,针对F型毒株的中和抗体效价达到1:26.8。免疫28d后对免疫组和对照组小鼠进行攻毒,免疫组小鼠病毒分离结果为阴性,对照组小鼠病毒分离结果为阳性,说明牛肠道病毒二价灭活疫苗对ICR小鼠具有很好的免疫保护作用,为今后BEV的疫苗研制打下了一定基础。
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