猪圆环病毒2型分子流行病学调查

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猪圆环病毒2型(Porcine circovurus type 2,PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征等相关疾病的重要病原。本研究应用复合PCR方法对江苏地区162份可疑病料进行了PCV1和PCV2检测,并对18头PCV2阳性猪病料的心、肝、脾、肺、肾、脑、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、扁桃体进行了检测。在患呼吸道疾病发病猪的肺泡巨噬细胞(PAM)中检测到了PRRSV和PCV2,完成了5株PCV2分离毒株的全基因组序列测定与分析。1、应用复合PCR方法,对江苏地区的162份可疑病料进行了检测,结果72份病料为PCV2阳性,17份为PCV1阳性,其中7份同时感染PCV1、PCV2。从发病时间看,以9月至11月发病最多,阳性率高达54.67%。样品较多的保育猪和育肥猪的阳性率分别是26.03%和68.12%。通过流行病学调查,表明该病已在江苏地区呈流行趋势。2、应用复合PCR方法,对18头PCV2阳性猪病料的心、肝、脾、肺、肾、脑、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、扁桃体进行检测,结果有7头PCV2阳性猪的各个脏器都能检测出PCV2;在这些脏器中,肺、腹股沟淋巴结、扁桃体的检出率都为100%,较其它受检脏器更适合作为PCV2的检测样品。3、对66份2004年10月至2005年8月患呼吸道疾病发病猪的肺组织进行PBS灌洗处理,获得肺泡巨噬细胞(PAM),用PAM抹片,应用间接免疫荧光试验(IIF)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV);同时提取PAM DNA作为模板,应用PCR方法检测猪圆环病毒2型。结果在66份PAM中,26份PRRSV阳性,23份PCV2阳性,其中8份同时检测出PRRSV和PCV2。以上结果表明,猪群中PRRSV和PCV2感染率都比较高,混合感染占有一定比例;应用IIF和PCR方法可以在PAM中检测PRRSV和PCV2。4、利用Dulac细胞从临床样品中分离到5株PCV2,分别命名为Jiangsu-HA, Jiangsu-JD, Jiangsu-TZ, Jiangsu-YX, Zhejiang-JX。用PCR方法扩增出5株分离毒株的全基因组,并将扩增片段克隆于pGEM-T easy载体里,经蓝白斑和氨
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