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大量的临床与实验研究资料表明，雄激素及其受体（Androgen receptor, AR）在精子发生过程中具有非常重要的作用。雄激素水平低下或AR基因突变可导致精子发生障碍和男性不育症；睾丸组织内不同细胞类型的条件性 Ar基因敲除小鼠研究表明，雄激素主要通过与睾丸支持细胞的AR作用，调控精子发生过程。因此，近年来人们一直在睾丸支持细胞寻找受雄激素及其受体调节的靶基因。本实验室采用数字化表达谱测序技术（Digital gene expression sequencing, DGE-seq）筛选到受雄激素及其受体下调的候选靶基因之一Srsf4（serine/arginine-rich splicing actor4）。最新的研究发现SRSF4与非梗阻性无精子症存在相关性，因此，我们推测Srsf4可能是支持细胞中受雄激素及其受体调控的靶基因。 目的:通过全身 Ar基因敲除小鼠模型和小鼠睾丸支持细胞来源的细胞系研究SRSF4受雄激素及其受体调控的分子机理及其与精子发生的关系，为进一步探索治疗男性不育症的方法提供新的思路。 方法:我们采用qRT-PCR和免疫荧光技术检测小鼠睾丸组织中Srsf4的表达量及SRSF4的表达定位。我们采用qRT-PCR、western blot和免疫荧光染色等技术比较全身AR基因敲除和野生型小鼠睾丸中SRSF4的表达差异、睾丸支持细胞系TM4细胞过表达及敲减AR后SRSF4的表达差异。同时，我们构建雄激素下调的动物模型，采用qRT-PCR检测Srsf4的mRNA水平。最后，我们采用双荧光素酶报告载体实验、凝胶迁移实验和染色质免疫共沉淀等方法研究雄激素及其受体调控 SRSF4的分子机理。 结果:SRSF4在睾丸组织中高表达，主要定位于睾丸支持细胞。与野生型雄鼠相比，全身Ar基因敲除小鼠睾丸组织中SRSF4表达显著升高。在TM4细胞中过表达AR后SRSF4表达下降，而敲减AR后SRSF4表达上升，并且，我们在出生后7天雄鼠身上注射氟他胺干扰内源性睾酮水平发现 Srsf4表达上升，继续注射睾酮后Srsf4表达回降，这些结果均提示SRSF4受雄激素及其受体下调。双荧光素酶报告载体实验，凝胶迁移实验和染色质免疫共沉淀等研究结果表明，雄激素及其受体特异性与Srsf4基因启动子区域的雄激素反应原件(androgen-responsive element, ARE)位点结合，下调其表达。 结论:在小鼠睾丸支持细胞中，雄激素及其受体直接特异性结合与 Srsf4基因启动子区域的ARE位点结合，从而下调其表达，表明Srsf4是睾丸支持细胞中受雄激素及其受体直接下调的一个新的靶基因。