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禽呼肠孤病毒感染引起了世界各国养禽生产严重的经济损失.本病以5-7周龄肉用鸡多发,肉用鸡的发病率可达100%,死亡率为1-3%.近年来,随着禽呼肠孤病毒的感染、流行日趋增加和临床疾病形式的不断多样化,防制禽类呼肠孤病毒感染的难度不断增大。为有针对性的防制禽类呼肠孤病毒感染,有必要对目前我国流行的禽呼肠孤病毒株的抗原性或血清型进行分析研究,本研究试图通过病原学、血清学实验和S3基因序列测定,分析我省一株鸡源呼肠孤病毒(CL) 的病原特性,理化特性,致病性,以及该毒株与其他三株禽呼肠孤病毒株(YB、YH-我国患病番鸭中分离株,和国外鸡源分离株S1133株)之间的血清学或抗原性关系,填补了我省对鸡源呼肠孤病毒病原学方面的空白,为制备疫苗的毒株筛选提供依据,并为禽呼肠孤病毒的流行病学调查和分类学工作提供素材。 本课题以四株不同的禽呼肠孤病毒株为研究材料,开展了病原学、血清学和基因序列测定的研究。1.以常规病毒分离方法,从临床发病鸡中采集病料,用SPF鸡胚分 离到一株形态典型、均一的毒株。2.采用离子交换捕捉技术处理经该病毒感染死亡鸡胚的尿囊液,经 负染后观察到直径为75nm左右的具有双层衣壳的病毒粒子。3.用鸡胚成纤维细胞培养病毒,感染的细胞产生了明显的CPE病变, 并进行病毒的扩大培养,细胞均可在48-72小时内出现明显病 变。4.选择1日龄的健康状况良好无感染本病的雏鸡,以不同的接种途 径,感染雏鸡。小鸡在接种1天后爪垫可见明显红肿;6天,爪 垫达到肿胀高峰期;9天,小鸡爪垫红肿开始消退。5.取病毒分别进行耐热性实验,脂溶剂敏感性实验和耐酸性实验。 实验结果表明:80℃和85℃感作30分钟,病毒可基本灭活,100 ℃感作30分钟能完全灭活该病毒;PH5对病毒感染性没影响, PH11、PH13可灭活该病毒;乙醚处理对病毒感染性没有影响。