功能互补型双元促胰岛素(rolGG)及其对糖尿病的疗效学研究

来源 :南开大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Vilmar
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
糖尿病是以持续高血糖为基本生化特征的一种慢性全身代谢性疾病,主要由胰岛素分泌绝或相对不足引发的糖、蛋白质、脂肪代谢紊乱综合病症。随着人们生活水平的提高,近年来糖尿病发病率呈现逐年上升趋势。因此,寻找更好的糖尿病治疗药物、给药途径和治疗方法是学术界亟待解决的重要课题。   胰高血糖素样多肽-1(GLP-1)是由肠道L细胞合成和分泌的由30个氨基酸组成的多肽。GLP-1具有促进葡萄糖依赖性胰岛素分泌、减少食物摄取、减慢胃排空,以及抑制胰高血糖素分泌、刺激胰β细胞增殖、促进胰岛再生、抑制胰β细胞的凋亡等特殊功能。   葡萄糖依赖性促胰岛素(GIP)是由肠道K细胞合成和分泌的由42个氨基酸组成的多肽。具有促进第一时相胰岛素的分泌,改善胰岛素敏感性,刺激胰β细胞再生,延缓胰岛素清除等作用,对2型糖尿病具有良好的治疗效果。   基于GLP-1及GIP在糖尿病治疗中的作用及各自的优势,本研究利用重组PCR的方法获得重组口服长效GLP-1(rolGLP-1)和GIP(rolGIP)融合基因(rolGG),并构建了表达载体pET-22b(+)-rolGG,将其转化大肠杆菌工程菌株BL21(DE3),以获得功能互补型双元促胰岛素rolGG,用于2型糖尿病小鼠药效学初步研究。将获得的工程菌株进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Westernblotting检测结果表明rolGG得到正确表达。对其诱导表达条件进行优化,结果表明在25℃下诱导12h,目的蛋白rolGG的表达量最高,占可溶性总蛋白的15%,产量达到330mg/L,为利用重组rolGG防治2型糖尿病奠定了良好的前期基础。   将诱导表达后的大肠杆菌工程菌株BL21(DE3)/rolGG细胞裂解上清液进行浓缩、纯化,获得了大量的rolGG样品,然后将其灌服高血糖C57/BL小鼠,结果发现rolGG处理组血糖显著降低,体重增加趋于正常,有效改善了糖尿病小鼠的饮食、饮水平衡。   本研究为功能互补型双元促胰岛素rolGG口服蛋白类药物的研发提供了较完善的实验和理论依据,并为利用重组rolGG口服防治2型糖尿病临床研究和应用奠定了基础。   本研究较为系统地疗效学研究结果证明,ro1GG具有良好的临床应用前景,其临床应用可能给广大糖尿病患者带来战胜糖尿病的希望。
其他文献
该文通过大量实验和对实验室各种合成3-羟基丁酸方法的分析,确定了3-羟基丁酸合适的工业化合成方法,并对通过3-羟基丁醛的液相氧化制备3-羟基丁酸的工艺进行了研究.
  The central challenge in tunable magnetic microwave devices lies in finding an energy efficient way to perform wide range ferromagnetic resonance(FMR)voltag
饱和液体的热力学性质和传递性质在化学工程是不可缺少的基本参数。在化工科研和生产中,物性与温度的关联尤为重要。鉴于目前各种估算方法存在的缺点,本文提出用神经网络预测饱