胃癌细胞中TRAF1基因的干扰对其凋亡和迁移功能的影响

来源 :中南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cxsxj
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
研究背景与目的:胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,目前国内外已有多项研究证实胃癌的发生与幽门螺杆菌(Helicobaeter pylori,H.pylori)有着密切的关系。本课题组通过前期研究发现正常胃粘膜上皮细胞株GES-1与胃癌组织来源的H.pylori共培养后可发生TRAF1基因上调的现象,并且在胃癌前病变及胃癌组织中有TRAF1表达增高的现象。而目前通过研究已经发现TRAF1与多种肿瘤的发生与发展有相关关系。所以本课题拟建立TRAF1基因干扰的瞬时转染的胃癌细胞模型来明确TRAF1在胃癌,特别是H.pylori相关的胃癌的发生和发展究竟存在怎样的相关性。方法:首先我们通过Real-time PCR和Western-blot两种方法来验证TRAF1在BGC823、SGC7901、MGC803三株胃癌细胞株的表达情况,并从中筛选TRAF1表达最高的一株细胞进行后期实验。我们根据参考文献构建3个TRAF1shRNA表达载体pLVX-shRNA2-TRAF1-shRNA1-3,然后用Lipofectamine2000脂质体将其分别转染至目标胃癌细胞株中,再应用Real-time PCR和Western-blot来检测转染前后细胞中TRAF1基因在mRNA和蛋白水平的表达变化,以此来验证干扰的效果,并且筛选出干扰效率最强的TRAF1shRNA来进行后续的实验。经检测确定TRAF1被成功干扰后,我们可通过MTT法、流式细胞技术检测TRAF1对胃癌细胞增殖活力和凋亡的影响,通过Transwell迁移实验来检测TRAF1对胃癌细胞迁移能力的影响。结果:1.在BGC823、SGC7901、MGC803三株胃癌细胞株中,TRAF1的表达较正常胃上皮细胞系GES-1均有上调,其中在BGC823细胞株中表达最高。2.根据参考文献选取的3个TRAF1shRNA对TRAF1基因均有干扰作用,其中以pLVX-shRNA2-TRAF1-shRNA2干扰效果最强。3.干扰胃癌细胞BGC823中的TRAF1可使细胞生长活力减弱,凋亡明显增加。4.干扰胃癌细胞BGC823中的TRAF1对细胞的迁移功能无显著影响。结论:在BGC823, SGC7901, MGC803三株胃癌细胞株中,TRAF1基因的表达均有上调的现象,并且以BGC823上调最明显。通过体外干扰胃癌细胞株BGC823,我们可以发现TRAF1可抑制BGC823细胞的凋亡。这些研究提示TRAF1在胃癌的发展过程中有可能发挥着抗凋亡的功能。这个结果可能为阐明胃癌特别是H.pylori相关的胃癌发生的分子机制提供一定的理论依据。
其他文献
林业资源不仅是我国重要的生态资源,也是促进我国经济发展的重要经济资源,保证林业的健康持续发展就必须重视病虫害问题。目前我国林业病虫害问题还十分严重,不仅影响到树木
2012年度中国科技人员在国内外发表论文数量和引文情况的统计分析工作已完成。国际论文数据主要采用国际权威检索数据库:科学引文索引(SCI)、工程索引(肼)、科学会议录引文索引(CPC
本文的主要目的是研究如下形式的非线性椭圆方程其中Ω(?)RN(N≥3)是有界光滑区域,权函数b(x)∈Ca(Ω)(αα∈(0,1))非负且在边界附近可能奇异或趋于零,f≥0在[0,∞)局部Lips
目的探讨超声引导下假性动脉瘤内注药封堵术的安全性和临床应用价值。方法回顾性分析354例行超声引导下凝血酶注射治疗的医源性假性动脉瘤患者的临床资料和超声特征,计算封堵
自2014年省教育厅教研室下发《优化幼儿园一日活动主题教研方案》之后,全省各地幼儿园依据《3-6岁儿童学习与发展指南》(以下简称《指南》)精神,立足本园教育教学中的实际问
随着移动端通信设备的应用普及,以响应式的综合性理念来设计及制作网站成为当今网页设计的客观所需。响应式页面设计的核心包含:媒体查询、流体布局、元素自适应设置等相关技
背景:子宫平滑肌肉瘤(leiomyosarcoma)是子宫肉瘤的一种,占子宫肉瘤约45%,是来源于子宫肌壁或肌壁间血管壁平滑肌组织的恶性肿瘤,也可为良性平滑肌瘤的恶变。子宫肉瘤罕见,恶