Pelota缺失引起单核糖体升高机制研究

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Pelota是一个非常保守的基因,它编码的蛋白在精子发生、细胞周期、减数分裂以及mRNA降解中具有重要的功能。为了更深入的揭开pelota的作用机制,对pelota进行了研究,发现pelota缺失细胞中单核糖体明显升高,而多核糖体则略有下降。围绕这一现象进行了一系列更深入的研究。  Pelota有助于蛋白的翻译,为了研究是否是由于缺失pelota后部分蛋白的翻译减缓而引起单核糖体的升高,将各种蛋白与pelota共表达。结果证明,pelota可以促进部分蛋白的表达,这种促进作用只影响基因的蛋白水平对mRNA水平没有明显影响,促进作用的强度随pelota的量的增加而加强,并且这种促进作用与蛋白的分子量大小、稳定性、终止密码子种类、稀有密码子含量等没有明显的关系。  据报道pelota与突变的18S rRNA的降解相关,为了研究是否是由于pelota缺失而导致含突变的18S rRNA的核糖体累积而引起单核糖体的升高,克隆了pelota敲低细胞与正常细胞的单核糖体中的18S rRNA,并进行测序。结果证明,pelota敲低并不会导致18S rRNA突变的累积。  Pelota还与翻译非正常停滞时核糖体的解聚相关,为了研究是否是由于pelota缺失后翻译非正常停滞的核糖体不能正常解聚而引起单核糖体的升高,利用oligo dT及同位素逆转的方法研究单核糖体中结合的正常mRNA的量。结果证明,pelota敲低细胞中的单核糖体有一部分并没有和正常的mRNA结合。
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