兔颈动脉粥样硬化斑块的CEUS、MMP-2、RAM-11与新生血管关系的研究

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目的:本研究旨在通过建立兔颈动脉粥样硬化模型,利用超声造影动态监测斑块内新生血管的发展情况,用免疫组织化学技术检测基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、小鼠抗兔巨噬细胞抗体11(rat anti-rabbit macrophage antibody 11,RAM-11)、血小板内皮细胞粘附分子-1(cluster of differentiation 31,CD31)的表达变化趋势,并进行MMP-2、RAM-11与CD31之间平均光密度值相关性分析,以期进一步阐明颈动脉粥样硬化斑块的形成机制和病理过程,为临床寻找治疗颈动脉粥样硬化斑块的有效药物提供理论基础。方法:将40只新西兰大白兔随机分为四组,A组(空白对照组)、B组(高脂饮食组)、C组(硅橡胶圈干预联合高脂饮食14天组)、D组(硅橡胶圈干预联合高脂饮食28天组)。在造模后第14天、第28天完善颈动脉超声及超声造影检查,了解颈动脉内斑块及斑块内新生血管情况,并绘制时间-强度曲线,记录斑块内造影剂的峰值强度。采用HE染色观察病理学变化,免疫组织化学检测MMP-2、RAM-11及CD31,分别计算阳性细胞的平均光密度,进行组间比较及相关性分析。结果:用硅橡胶圈干预联合高脂饮食的方法成功制备了兔颈动脉粥样硬化模型。模型组在第14天、第28天行超声及超声造影检查时发现硅橡胶圈段兔颈动脉内有AS斑块及新生血管形成。血脂结果显示高脂饮食组较空白对照组明显升高(P<0.05)。HE染色显示模型组硅橡胶圈段兔颈动脉内斑块形成,内膜增厚,局部平滑肌细胞增殖及迁移。免疫组化检测到模型组斑块内阳性表达的MMP-2、RAM-11及CD31,统计分析显示C组、D组活性分子表达的平均光密度值差异有显著性(P<0.05),同时进行相关性分析发现MMP-2、RAM-11与新生血管呈正相关(P<0.01)。结论:1.硅橡胶圈干预联合高脂饮食的方法能成功制备兔颈动脉粥样硬化模型。2.超声造影能动态观察兔颈动脉粥样硬化斑块内新生血管的发展变化。3.兔颈动脉粥样硬化斑块内有新生血管形成,而且斑块内新生血管数量与MMP-2、RAM-11的表达呈正相关。
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