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目的：
研究野百合碱（monocrotaline，MCT）诱导的肺动脉高压（pulmonary hypertension,PH）大鼠模型的炎症过程及淫羊藿苷（Icariin，ICA）改善该模型的作用机制。
方法：
实验分组及给药方案：①MCT-PH炎症过程研究：将SD大鼠随机分为对照组（7只）和MCT组（70只）。MCT组单次腹腔注射MCT（50mg/kg）复制PH模型，对照组给予等量生理盐水。随后将MCT组按时间分为10个亚组（各7只）。每3天为一亚组。②ICA早期短期给药改善MCT-PH作用抑制研究：118只雄性SD大鼠分为对照组、MCT组（60mg/kg，腹腔注射）、ICA60组（60mg/kg，灌胃）、ICA120组（120mg/kg，灌胃）、地塞米松组（Dexamethasone，Dex；1mg/kg，灌胃）、LY组（LY294002，PI3K抑制剂；1mg/kg，腹腔注射）、ICA120+LY组，每组10只；③ICA早期短期给药阻止MCT-PH进展作用研究：48只大鼠，随机分为对照组、MCT组（60mg/kg）、ICA60组、ICA120组，每组12只。②和③所有大鼠除对照组给予等量生理盐水外，其余组腹腔注射MCT复制PH模型。给予MCT10h后根据分组给药，MCT组和对照组给予生理盐水，连续7天，每天1次。
实验指标检测方法：实验期间观察大鼠一般情况并记录体重。分组方案①中大鼠按分组时间点检测各项指标并收集标本；分组方案②中大鼠于末次给予ICA2h后检测各项指标并收集标本。分组方案③于给予MCT第28天检测各项指标并收集标本。导管法测量mPAP；称量心脏并计算右心室肥厚程度；HE和Masson染色观察肺血管重构；采用流式细胞术检测肺泡灌洗液和灌洗后肺组织匀浆液中M1/M2型巨噬细胞比值（灌洗后的肺组织不再用于其他指标的检测）。采用免疫组化染色观察肺血管巨噬细胞浸润情况；Real-time RT-PCR检测目的基因mRNA水平；Westernblot检测p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR、IL-1β、TNF-α、ARG1、TGF-β、IL-10、IL-6蛋白水平。
结果：
1、MCT-PH炎症过程研究：mPAP、RVHI和RVMI在注射MCT后第6天升高，第30天翻倍。HE和Masson染色显示肺动脉重构和纤维化在第6天增加，在第30天达到峰值。促炎细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6在MCT注射后第6天升高，并在24-27天达到峰值，抗炎细胞因子ARG1在第15天升高，IL-10在24天升高，而TGF-β表达呈相反的变化趋势。PI3K/Akt信号通路随着肺动脉高压的发展而增加，与促炎因子呈强相关、与ARG1和IL-10呈中等程度相关、与TGF-β不相关。
2、ICA改善MCT-PH作用机制研究：大鼠在给予MCT7天时，与对照组相比，MCT组mPAP、RVHI、RVMI明显升高，肺动脉管壁增厚、管腔狭窄、胶原纤维沉积并有大量巨噬细胞浸润，肺泡灌洗液和灌洗后肺组织M1/M2型巨噬细胞比值明显升高；p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、IL-1β、TNF-α蛋白水平显著增高，TGF-β、ARG1蛋白水平显著降低。ICA显著降低大鼠mPAP，改善右心室肥厚、肺动脉管壁厚度以及周围胶原纤维沉积，且明显降低肺泡灌洗液、灌洗后肺组织M1/M2型巨噬细胞比值和p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、IL-1β、TNF-α蛋白水平，但显著升高TGF-β、ARG1蛋白水平。ICA120组和Dex组疗效相当，ICA120+LY组疗效优于单独给药组。大鼠在给予MCT28天时，发现ICA能够阻止PH病程的发展。
结论：
1、MCT诱导的PH病程渐进，并伴随着持续的炎症反应。PH炎症在早期是轻度的，而在后期是剧烈的。早期的抗炎干预可能是针对PH的一种新的治疗策略。
2、ICA早期、短期给药可改善MCT-PH，并阻止其病程发展，作用机制与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路激活、调节巨噬细胞的极化状态有关。
研究野百合碱（monocrotaline，MCT）诱导的肺动脉高压（pulmonary hypertension,PH）大鼠模型的炎症过程及淫羊藿苷（Icariin，ICA）改善该模型的作用机制。
方法：
实验分组及给药方案：①MCT-PH炎症过程研究：将SD大鼠随机分为对照组（7只）和MCT组（70只）。MCT组单次腹腔注射MCT（50mg/kg）复制PH模型，对照组给予等量生理盐水。随后将MCT组按时间分为10个亚组（各7只）。每3天为一亚组。②ICA早期短期给药改善MCT-PH作用抑制研究：118只雄性SD大鼠分为对照组、MCT组（60mg/kg，腹腔注射）、ICA60组（60mg/kg，灌胃）、ICA120组（120mg/kg，灌胃）、地塞米松组（Dexamethasone，Dex；1mg/kg，灌胃）、LY组（LY294002，PI3K抑制剂；1mg/kg，腹腔注射）、ICA120+LY组，每组10只；③ICA早期短期给药阻止MCT-PH进展作用研究：48只大鼠，随机分为对照组、MCT组（60mg/kg）、ICA60组、ICA120组，每组12只。②和③所有大鼠除对照组给予等量生理盐水外，其余组腹腔注射MCT复制PH模型。给予MCT10h后根据分组给药，MCT组和对照组给予生理盐水，连续7天，每天1次。
实验指标检测方法：实验期间观察大鼠一般情况并记录体重。分组方案①中大鼠按分组时间点检测各项指标并收集标本；分组方案②中大鼠于末次给予ICA2h后检测各项指标并收集标本。分组方案③于给予MCT第28天检测各项指标并收集标本。导管法测量mPAP；称量心脏并计算右心室肥厚程度；HE和Masson染色观察肺血管重构；采用流式细胞术检测肺泡灌洗液和灌洗后肺组织匀浆液中M1/M2型巨噬细胞比值（灌洗后的肺组织不再用于其他指标的检测）。采用免疫组化染色观察肺血管巨噬细胞浸润情况；Real-time RT-PCR检测目的基因mRNA水平；Westernblot检测p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR、IL-1β、TNF-α、ARG1、TGF-β、IL-10、IL-6蛋白水平。
结果：
1、MCT-PH炎症过程研究：mPAP、RVHI和RVMI在注射MCT后第6天升高，第30天翻倍。HE和Masson染色显示肺动脉重构和纤维化在第6天增加，在第30天达到峰值。促炎细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6在MCT注射后第6天升高，并在24-27天达到峰值，抗炎细胞因子ARG1在第15天升高，IL-10在24天升高，而TGF-β表达呈相反的变化趋势。PI3K/Akt信号通路随着肺动脉高压的发展而增加，与促炎因子呈强相关、与ARG1和IL-10呈中等程度相关、与TGF-β不相关。
2、ICA改善MCT-PH作用机制研究：大鼠在给予MCT7天时，与对照组相比，MCT组mPAP、RVHI、RVMI明显升高，肺动脉管壁增厚、管腔狭窄、胶原纤维沉积并有大量巨噬细胞浸润，肺泡灌洗液和灌洗后肺组织M1/M2型巨噬细胞比值明显升高；p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、IL-1β、TNF-α蛋白水平显著增高，TGF-β、ARG1蛋白水平显著降低。ICA显著降低大鼠mPAP，改善右心室肥厚、肺动脉管壁厚度以及周围胶原纤维沉积，且明显降低肺泡灌洗液、灌洗后肺组织M1/M2型巨噬细胞比值和p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、IL-1β、TNF-α蛋白水平，但显著升高TGF-β、ARG1蛋白水平。ICA120组和Dex组疗效相当，ICA120+LY组疗效优于单独给药组。大鼠在给予MCT28天时，发现ICA能够阻止PH病程的发展。
结论：
1、MCT诱导的PH病程渐进，并伴随着持续的炎症反应。PH炎症在早期是轻度的，而在后期是剧烈的。早期的抗炎干预可能是针对PH的一种新的治疗策略。
2、ICA早期、短期给药可改善MCT-PH，并阻止其病程发展，作用机制与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路激活、调节巨噬细胞的极化状态有关。