姜黄素联合维生素C对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响

来源 :延安大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bisha1007
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【目的】研究不同浓度姜黄素、维生素C及两药联合对人胃癌SGC-7901细胞的增殖作用、细胞周期及诱导细胞凋亡的影响。探讨姜黄素、维生素C作用于人胃癌SGC-7901细胞不同时间的半数抑制浓度及两药联合的作用效果。以期寻找新的化疗药物、化疗方案及合适的作用浓度,为临床治疗中进一步提高胃癌的化疗效果并减轻化疗不良反应提供理论和实验依据。【方法】1.采用MTT法检测不同浓度姜黄素(5、10、20、40μmol/L)、维生素C(0.25、0.5、1.0、2.0mg/mL)及两药联合作用于SGC-7901细胞24、48、72h后细胞生长情况;利用统计学软件分析不同时间的IC50值,分析两药联合作用效果。用倒置显微镜观察姜黄素(5、10、20、40μmol/L)、维生素C(0.25、0.5、1.0、2.0mg/mL)及两药联合作用于SGC-7901细胞48h后细胞数量及形态变化。2. PI染色流式细胞术检测姜黄素(20、40μmol/L)、维生素C(1.0mg/mL)及两药联合作用于SGC-7901细胞48h后对细胞周期的影响。3. Annexin-V/Pl染色流式细胞术检测姜黄素(20、40μmol/L)、维生素C(1.0mg/mL)及两药联合作用于SGC-7901细胞48h后细胞凋亡率。用荧光显微镜观察姜黄素(20、40μmol/L)、维生素C(1.0mg/mL)及两药联合作用于SGC-7901细胞48h后细胞凋亡形态及数量的变化。【结果】1.不同浓度(5、10、20、40μmol/L)姜黄素作用于人胃癌SGC-7901细胞24、48、72h后均有增殖抑制作用,且随着浓度增加、作用时间延长,增殖抑制率也增强,表现为时间-剂量依赖性;不同浓度(0.25、0.5、1.0、2.0mg/mL)维生素C作用后随浓度的增加,增殖抑制作用逐渐增强,但随时间延长抑制率未发生明显改变(P>0.05)。两药联合作用后,抑制率较单独用药明显提高,作用24h为药效相加,48h、72h在两药最高浓度联合为药效相加,余浓度联合为药效协同。两药联合作用48h后在效应为0.5时所用单药剂量最小。倒置显微镜观察各组药物随浓度的增加坏死脱落细胞增多,联合组高于单药组。2.不同浓度姜黄素(20、40μmol/L)、维生素C(1.0mg/mL)及两药联合作用于人胃癌SGC-7901细胞48h后,与阴性对照组比较,对SGC-7901细胞均有G0/G1期阻滞作用,姜黄素高浓度组及联合作用高浓度组阻滞细胞比例数目增多更为明显。3.不同浓度姜黄素(20、40μmol/L)、维生素C(1.0mg/mL)及两药联合作用于人胃癌SGC-7901细胞48h后,与阴性对照组比较,两药均可诱导凋亡。结果显示姜黄素组的凋亡率明显高于对照组,呈量效关系;两药联合后的凋亡率高于两药单用组,具有统计学意义(P<0.05)。荧光显微镜下观察姜黄素组凋亡细胞数随着药物浓度的增加而增多;维生素C组与对照组比较凋亡细胞明显增加。两药联合组凋亡细胞数高于两药单用组。【结论】姜黄素和维生素C对人胃癌SGC-7901细胞有增殖抑制作用,姜黄素在一定浓度范围内,随时间的延长及浓度的增加,增殖抑制作用增强,而维生素C仅随浓度增加增殖抑制作用增强,与时间延长无明显关系;两药联合作用后,增殖抑制作用高于两药单用组,作用24h为药效相加,48h、72h在两药最高浓度联合为药效相加,余浓度联合为药效协同。两药单用及联合都可阻滞细胞周期于G0/G1期,联合作用组阻滞细胞比例数较单独用药组增加;两药联合诱导细胞凋亡作用明显强于两药单用组。为两药联合应用于胃癌临床化疗提供实验依据。
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