【摘 要】
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猪囊虫病（Cysticercosis cellulosae）是由猪肉绦虫（Taenia solium）的幼虫-猪囊尾蚴（Cysticercus cellulosae）感染猪或人而引起的人畜共患寄生虫病，在我国及世界各地广泛流行，严重危害
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猪囊虫病（Cysticercosis cellulosae）是由猪肉绦虫（Taenia solium）的幼虫-猪囊尾蚴（Cysticercus cellulosae）感染猪或人而引起的人畜共患寄生虫病，在我国及世界各地广泛流行，严重危害人体健康，并制约着养猪业的发展。通过寻找功能抗原基因，在体外进行表达可以解决其诊断和免疫抗原来源有限的难题。磷蛋白位于核糖体60S亚基上，亚基缺失和抑制实验证明，磷蛋白与蛋白质的合成密切相关。国外研究证明，猪囊虫磷蛋白能被囊虫病人血清所识别。本研究从猪囊尾蚴虫体中提取总RNA，进而通过oligo（dT）为探针分离mRNA，用GOLDKey软件设计磷蛋白特异性引物，通过RT—PCR扩增出一366bp的片段，扩增产物连接到PGEM—Teasy载体中，经酶切鉴定、PCR分析以及确证性测序后证明，所克隆的366bp的片段含P2蛋白基因完整的开放阅读框，其核苷酸序列和氨基酸序列与国外发表的P2基因的同源性分别为99.45％和98.36％。将重组质粒PGEM—P2和表达载体pProEX-HTb分别酶切后，亚克隆P2至原核表达载体pProEX-HTb中，通过酶切鉴定及PCR扩增筛选阳性克隆，用IPTG诱导表达，收集不同时间的菌液进行ELISA检测、SDS—PAGE电泳、Westernblot分析，结果表明，磷蛋白基因在大肠杆菌中成功表达，其表达产物为分子量15KD的融合蛋白，并能被猪囊虫阳性血清所识别。
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