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我们在对一个细胞因子类似因子-CKLF的研究过程中,发现在其染色体区域附近约10 Mb处存在一个新的蛋白质编码基因.对这个基因进行生物信息学分析,没有得到有关趋化因子的提示,这个基因的结构分析表明从4-135氨基酸为一个DIM1结构域,因此我们将这个基因编码的蛋白称为DIM1-like Protein(DLP).氨基酸序列进行同源性分析发现DLP与酵母的一个15 KD的剪接体蛋白U5有弱的同源性,和一种有丝分裂蛋白DIM1及人硫氧还蛋白分别有39%、24%的同源性,同时发现它在人、鼠、Arabidopsis thaliana、Oryza、melanogaster、果蝇、酵母菌等各种属之间有相当的保守性.DLP的序列与Golemis命名的DIM2相同(Zhang et al.1999).因此,我们推测DLP也许是DIM1家族的成员之一.向GenBank提交登记获得接受,GenBank的登记号为AY566808.DIM1属近几年发现的一个硫氧还原蛋白超家族的第六分支.在人和酵母中,DIM1蛋白是U4/U6和U5 tri-snRNP的一个亚基,其突变能使细胞停滞在G2/M期并且影响Pre-mRNA剪接过程.考虑到DIM1蛋白可能是通过影响Pre-mRNA的剪接来间接影响细胞周期,所以我们设想DLP也可能参与Pre-mRNA剪接的过程.我们首先对DLP进行表达谱分析,Nothem Blot显示DLP在骨骼肌、肝脏、心脏和胰腺中高表达,在肾脏,脑和胎盘中中等程度的表达,在肺中表达较低.RT-PCR证实DLP在人的乳腺癌细胞MCF-7,肝癌细胞HepG2和子宫内膜癌细胞Ishikawa中也有高表达.说明DLP在体内多个组织均有表达但又有特异性.用绿色荧光蛋白做定位表明DLP定位于核内,推测DLP可能在剪接和转录过程中发挥作用.在原核细胞中表达了DLP,并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.利用制备的多克隆抗体进行Western Blot检测发现DLP在MCF-7细胞中有内源性表达.用GST Pull-down实验筛选DLP相互作用的蛋白质,发现DLP与剪接相关因子Prp6(U5-102 KD)在体外存在直接的相互作用.缺失体研究证实DLPN端的33个氨基酸是与Prp6相互作用的区域.免疫共沉淀实验和酵母双杂实验以及共聚焦进一步证明DLP和Prp6的确存在相互作用.体外剪接实验证实DLP能促进剪接底物Adml-M3 Pre-mRNA的剪接.我们的研究结果表明DLP可能是一个新的参与Pre-mRNA剪接和细胞周期调控的蛋白因子.DLP的发现不仅提供了一个发现新的功能基因的实例,而且对于进一步理解Pre-mRNA剪接的机制,细胞周期的过程,以及Pre-mRNA剪接和其它细胞功能的联系和基因表达调控网络是非常有帮助的.