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家蚕细菌病和真菌病每年都给蚕桑生产造成严重的经济损失,现有药物虽有较好的防治效果,但也存在一些缺点,如长期使用能够使病原菌抗药性增强,污染环境,有些药物甚至对人有害等。为克服现有药物的诸多限制性问题,开发新型微生物药剂作为蚕药是一个重要的研究方向。本实验室从桑树健康叶片中分离到一株内生菌Burkholderia cepacia Lu10-1,该菌株对桑炭疽病菌(Colletotrichum morifolium)、桑粘格孢菌(Septogloeum mori)、杨树水泡溃疡病菌(Dothiorella gregaria)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)以及苏芸金芽孢杆菌(Bacillus thuringis)等多种动植物病原菌具有较强的拮抗作用,且能够进入桑树体内稳定定殖,呈现出良好的开发前景。本研究通过形态观察法和药理实验法两种方法探讨Burkholderia cepacia Lu10-1菌株对家蚕黑胸败血菌(Bacillus bombysepticus)和白僵菌(Beauveria bassiana)的抑菌机制,研究该菌株发酵上清液对家蚕黑胸败血病和白僵病的防治效果,并探讨其对家蚕生理及茧质的影响。主要研究结果如下:1测定了Lu10-1菌株抗菌粗提物对家蚕黑胸败血菌的拮抗效果和最小抑杀菌浓度。结果表明:抗菌粗提物对黑胸败血菌具有较强的拮抗作用,其抑菌圈直径为18.20 mm;最小抑菌浓度(MIC)和杀菌浓度(MBC)分别为1.56 mg/mL和3.13 mg/mL。2采用分光光度法、电导率法和SDS-PAGE分析等方法测定了Lu10-1菌株抗菌粗提物对黑胸败血菌生长、胞外溶液电导率、胞内外总糖、胞内外蛋白质的影响。结果表明:经抗菌粗提物处理后,黑胸败血菌未出现对数生长期、细胞膜的渗透性发生改变、胞内糖和蛋白质发生渗漏、胞内分子量较大的蛋白出现降解现象。3采用扫描电镜和透射电镜分别观察了Lu10-1菌株抗菌粗提物对黑胸败血菌菌体形态和结构的破坏情况。结果表明:抗菌粗提物能够使黑胸败血菌菌体破裂,细胞内容物流出,形成空腔,最后消融。表明抗菌粗提物的抑菌机制为破坏黑胸败血菌的细胞壁或细胞膜。4测定了Lu10-1菌株抗菌粗提物对家蚕白僵菌的拮抗效果、对孢子萌发和菌丝的抑制作用。结果表明:抗菌粗提物对白僵菌具有较强的拮抗作用,其抑菌圈直径为17.00 mm;抗菌粗提物可以有效的抑制白僵菌孢子的萌发和菌丝的生长。5采用光学显微镜、扫描电镜和透射电镜分别观察了Lu10-1菌株抗菌粗提物对白僵菌孢子、菌丝的形态和结构的破坏情况。光学显微镜观察结果表明:抗菌粗提物作用于孢子后,孢子出现聚集、内容物分布不均、变形、空腔及胞壁断裂等异常,作用于菌丝后,菌丝出现变粗、扭曲、皱褶、膨大、消融等现象;电镜观察结果表明:抗菌粗提物能够使白僵菌孢子和菌丝的细胞质浓缩,质壁发生分离,细胞壁变薄、破裂,内容物流出,形成空腔。说明抗菌粗提物的抑菌机制为破坏白僵菌的细胞壁或细胞膜。6测定了Lu10-1菌株发酵上清液对家蚕黑胸败血病和白僵病的防治效果、及对家蚕生长发育和茧质的影响。结果表明:发酵上清液对黑胸败血病和白僵病具有较好的防治效果,对黑胸败血病的预防和治疗有效率分别为41.19%和24.00%,对白僵病的预防和治疗有效率分别为55.88%和34.00%;发酵上清液对家蚕的生长发育和茧质无不良影响。