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【目的意义】地中海贫血(Thalassemia)是一种具有高发病率的常染色体遗传病。在云南、贵州、广西、广东等有较高的发病率。本课题主要采用基因诊断技术检测地中海贫血及运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测DNA的甲基化转移酶DNMT1、DNMT3A、DNMT3B在地中海贫血患儿中的表达,从表观遗传学方面探讨其在地中海贫血的发病机制中的作用,为全面认识该疾病的分子机理提供一定的理论基础,为寻求新的诊断、预防及治疗地中海贫血的方法提供相应的实验室数据。【研究方法】选择70例临床疑诊为地中海贫血的患儿,通过基因诊断检测确诊为地中海贫血患儿50例。采集该50例地中海贫血患儿和正常对照组35例儿童的外周血标本置于-80℃的冰箱内保存。提取细胞总RNA,利用实时荧光定量(RT-PCR)的方法检测DNMT1、DNMT3A、DNMT3B的表达,据所得数据采用计算机SPSS13.0统计学软件进行资料的统计学处理(统计结果P<0.05时有统计学意义)。然后对结果进行分析。【研究结果】①结合临床表现初诊为地中海贫血患儿70例,通过基因诊断确诊为地中海贫血患儿50例,其中α-地中海贫血患儿9例,β-地中海贫血36例,α地贫β地贫复合型患儿5例,示β-地中海贫血的发病率明显高于α-地中海贫血。②地中海贫血患儿50例及正常对照组儿童35例标本进行RT-PCR检测三种甲基化转移酶的表达,显示地中海贫血患儿中DNMT3a、DNMT3b的表达值明显高于正常对照组(p<0.05)；DNMT1的表达与正常对照组相比,差异无显著性(p>0.05)。【结论】本实验结果提示：1、地中海贫血基因诊断方法高效、准确、成熟可靠,可广泛推广于临床应用并应注意α地贫和β地贫应两者同时检测,以免漏诊。2、本研究50例地贫患儿β地贫中654/N 21例,提示云南地区地贫654/N型可能是最常见的类型。3、研究显示DNMT3a、DNMT3b在地中海贫血的发生、发展中起着重要作用,可作为早期诊断的有效指标,DNMT1与地中海贫血的发展无明显的相关性。