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鸭病毒性肝炎(duck viral hepatitis，DVH)是由鸭肝炎病毒(duck hepatitis virus，DHV)引起雏鸭的一种急性、高度接触性传染病。近几年来，鸭病毒性肝炎出现了新的流行趋势，标准DHV—Ⅰ弱毒疫苗或其抗体对雏鸭鸭肝炎的保护效果不甚理想。本文通过对广东分离的2株DHV的部分生物学特性研究，DHV开放阅读框各基因的序列对比分析，综合分析VP0、VP3、VP1蛋白的特性，探讨本地区近几年鸭病毒性肝炎的流行趋势及变异情况，力求解释标准DHV—Ⅰ弱毒疫苗或其抗体对雏鸭鸭肝炎疫情的保护效果不理想的原因。
本研究采用鸭胚尿囊腔接种的方法，将鸭病毒性肝炎SN株及GD—B株复苏增殖，2株病毒均能致死鸭胚、鸡胚；通过对两毒株的鸡胚半数致死量(CELD50)的测定，初步确定两毒株的毒力强弱，通过试验得出，SN株的CELD50为10-4.68/0.2 mL，GD—B株的CELD50为10-4.62/0.2mL；根据中和试验的结果，标准Ⅰ型阳性血清对SN株和GD—B株的半数保护的血清稀释度(血清效价)分别为1：50(≥50阳性)和1：23.3(10～49可疑)，表明标准Ⅰ型阳性血清对SN株和GD—B株免疫保护指数较低，SN株及GD—B株经过与标准强弱毒株的CELD50比较，初步确定均为中强毒力的毒株；用鸭胚成纤维细胞(DEF)对这两毒株进行培养，经RT-PCR鉴定表明，两毒株均能在DEF中增殖，且产生CPE，用其细胞培养液接种鸭胚不致死鸭胚，且胚体无任何病变。
根据GenBank发表的3株鸭肝炎病毒的全基因组序列(江苏弱毒株A66、台湾强毒株03D、广东变异株FS)设计8对特异性引物，通过RT-PCR方法扩增DHV弱毒疫苗株、SN株和GD—B株开放阅读框各基因，将扩增产物分别克隆于PMD—18T载体中，转化E.coli DH5α感受态细胞，筛选阳性克隆，对阳性克隆进行测序，并利用分子生物学软件对DHV弱毒疫苗株、SN株和GD—B株序列进行拼接，序列分析结果表明，3株毒株的ORF均为6，747nt，编码2，249个氨基酸，与DHV—Ⅰ核苷酸序列相似性为94.4～99.5％，氨基酸序列相似性为93.5～99.4％。与DHV变异株核苷酸序列相似性为72.6～73.5％，氨基酸序列相似性为79.2～84.4％。
根据VP1的氨基酸序列，绘制了DHV系统发育进化树。结果显示，参比的13株DHV可以分为两个大群，一大基因群包括本研究的3株毒株在内的DHV—Ⅰ型，这一大基因群可以细分为3个亚群，SN株和GD—B株同属于以R85952为代表的强毒株群中，弱毒疫苗株属于以A66为代表的弱毒株群中，另外一群均为在浙江分离的强毒株；另一大基因群为DHV变异株，可以分为2个亚群，一群是中国台湾变异株，另一群是中国大陆及韩国的变异株。
本研究还应用DNAStar Protean软件综合分析了VP0、VP3、VP1蛋白的二级结构、亲水性、表面特性、柔韧性和抗原指数，并对各个蛋白的B抗原表位进行了预测。结果表明VP0蛋白的B细胞表位可能在94～96区域内或附近。VP3蛋白的B细胞表位可能在1～20，176～186这些区域内或附近。VP1蛋白的B细胞表位可能在183～186，209～219这些区域内或附近。